冰冻切片vs石蜡切片？一张决策卡不再纠结
刚取下来的组织，到底做冰冻还是石蜡？两者虽然都是把组织切成薄片，但样本处理方式、成像效果和适用实验并不相同！❄️ 冰冻切片：取材→OCT包埋→快速冷冻→切片，省去脱水浸蜡，制片快，对脂质、酶活性、天然荧光、温度敏感抗原的保留更有优势。适合：荧光蛋白原位观察、油红O脂质染色、部分免疫荧光、酶活性
多重免疫组化mIHC流程！27步从烤片到封片
多重免疫组化（mIHC）还不会做？以 Alpha Bas 试剂盒为例，FFPE 样本全流程 27 步整理好了准备：10% 中性福尔马林固定 8-48h 最佳，切片 3-4μm 防脱载玻片；工作液务必使用前半小时内配！预准备：60℃ 烤片 60min → 二甲苯脱蜡 ×3 → 梯度乙醇水化 → 微波抗原修复（预热5min-高火2min-低火15min）自
免疫组化IHC全流程，10步拆到手把手
IHC 总做不出漂亮结果？把这份「抗体探针染色」说明书收好原理一句话：利用抗原-抗体特异性结合，用标记抗体在组织切片上定位目标蛋白，显微镜下直接看位置和数量。主要材料：组织样本（石蜡/冷冻切片）｜一抗+HRP标记二抗+稀释液｜DAB显色液+苏木素｜抗原修复液、组化笔、PBS、封闭剂、梯度乙醇、二甲苯10 步流程（含
免疫组化全套protocol！13小步从切片到封片
一份能直接照着做的免疫组化完整 protocol，从切片到封片 13 小步全流程前处理：连续 3-4μm 切片 → 60℃ 烤片 1-2h → 过缸脱蜡水化（二甲苯 10min×3 → 梯度酒精各 5min）→ 微波抗原修复（低火5min-中火5min-高火10min，时间只多不少，降至室温静置≥2h）→ 3%H2O2 阻断 30min → 组
免疫组化染成「一片红」？8个翻车点逐个排查
做免疫组化最崩溃的瞬间：整张片子脏脏一片红 别急着怪抗体，8 个高频翻车点逐个排查1️⃣ 用了多抗 → 换高纯度单抗，背景干净很多2️⃣ 抗体浓度过高/孵育过长 → 预实验摸浓度，加完抗体立刻上定时器3️⃣ DAB 显色太久/变质 → 显微镜下盯着，浅棕立刻冲；DAB 现用现配，临用前才加 H2O24️⃣ 内源性酶和生
IHC/IF样本准备避雷帖！切片爬片滴片全要求
免疫组化/免疫荧光实验，样本不合格=白做！这份样本准备档案卡请收好石蜡切片：放置不能超半年，否则抗原丢失可能假阴性，有蜡块最好重切冰冻切片：厚度≤10μm、-20℃ 保存，超三个月抗原丢失严重，20μm 厚片易掉片+抗体不易进入细胞爬片：密度最好 10⁵，6 孔板密度 50-70% 再爬；组化别用 12 孔板或更小！PFA 固定
ELISA/WB/IF/IHC对比表！做完实验才不踩坑
新生必存！四大蛋白检测方法一次分清ELISA：定量王者，pg/mL 级灵敏度，但只能测可溶性分泌蛋白、无法定位WB：看分子量和亚型，验证蛋白表达，半定量、步骤多耗时长IF/ICC：荧光定位蛋白在细胞里的位置（膜/核/质），直观但易淬灭IHC：组织原位定位，保留形态信息，临床病理研究主力，半定量主观性强一张表从检测原理、目标