凋亡实验的主力指标:CASP3 抗体怎么挑(人源样品)
凋亡实验看 Caspase-3 的时候,最常见的误判是把前体条带当成了活化证据。全长和切割带加起来才是完整信息,抗体如果只认其中一种形式,结论可能正好反过来。做药物筛选、放疗机制的同学,WB 上这两条带的消长几乎是每天要看的图。
CASP3(Caspase-3)是凋亡执行阶段的核心蛋白酶,平时以约 32-35 kDa 的前体存在,凋亡信号激活后被切割成 17/19 kDa 的亚基。它负责切割 PARP、ICAD 等底物,是凋亡终点的常用读出。基因名 CASP3,蛋白一般写作 Caspase-3。
这一组产品针对的抗原是 CASP3,反应种属:Human。下面把各款的特点摊开讲。
各款特点,挨个说
Abcam 的 AB2302(Anti-Cleaved Caspase-3 antibody),Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB。
Abcam 这款 Ab13847,品名是 Anti-Caspase-3 antibody,Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB。
再看 Abcam 的 Ab32042:Anti-Cleaved Caspase-3 antibody [E83-77],Rabbit / IgG 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IF/ICC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/500。
Abcam 的 Ab32351 值得单独说说——Anti-Caspase-3 antibody [E87],Rabbit / IgG 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、FCM、IF/ICC、IP。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/5000。
接下来是 Abcam 的 Ab49822(Anti-Caspase-3 antibody),Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IF/ICC。
Abcam 的 Ab4051(Anti-Caspase-3 antibody),Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC。
Abcam 这款 Ab32150,品名是 Anti-pro Caspase-3 antibody [E61],Rabbit / IgG 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、FCM、IF/ICC、IP。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/1000。
再看 Abcam 的 Ab44976:Anti-Caspase-3 antibody,Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB。
到底怎么选?
WB 选能同时识别全长和切割形式的产品,一次曝光看两带消长。加凋亡刺激后的时间点先做预实验摸清,处理慢了切割带可能降解。阳性对照用星形孢菌素或依托泊苷处理的细胞,切割带一目了然。IHC 想做组织原位凋亡评估,选识别活化形式的克隆。通路验证时搭配 PARP、BCL-2 家族一起看。
相关产品列表
| 品牌 | 货号 | 品名 | 抗原名称 |
|---|---|---|---|
| Abcam | AB2302 | Anti-Cleaved Caspase-3 antibody | CASP3 |
| Abcam | Ab13847 | Anti-Caspase-3 antibody | CASP3 |
| Abcam | Ab32042 | Anti-Cleaved Caspase-3 antibody [E83-77] | CASP3 |
| Abcam | Ab32351 | Anti-Caspase-3 antibody [E87] | CASP3 |
| Abcam | Ab49822 | Anti-Caspase-3 antibody | CASP3 |
| Abcam | Ab4051 | Anti-Caspase-3 antibody | CASP3 |
| Abcam | Ab32150 | Anti-pro Caspase-3 antibody [E61] | CASP3 |
| Abcam | Ab44976 | Anti-Caspase-3 antibody | CASP3 |