做荧光蛋白标签,GFP 抗体选购指南
用 GFP 做融合蛋白的同学,最怕固定之后荧光直接消失,或者做 WB 时融合蛋白降解出了杂带。这时候抗 GFP 抗体就是救场的:不管荧光还在不在,只要蛋白还在,抗体就能认出来。不过不同产品对 GFP 突变体的识别范围不一样,买之前要看清楚。
GFP 来自维多利亚水母,是最经典的绿色荧光蛋白标签。现在常用的 EGFP、mNeonGreen 等突变体亮度更高、成熟更快,但序列和野生型有差异。抗 GFP 抗体识别的是蛋白本身的表位,不受荧光状态影响,固定、包埋、变性条件下都能用,还能做 IP 拉融合复合物。
这一组产品针对的抗原是 GFP tag,反应种属:标签蛋白(无特定反应种属限制)。下面把各款的特点摊开讲。
各款特点,挨个说
proteintech 的 50430-2-AP(GFP tag Polyclonal antibody),Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB、ELISA、IF/ICC、IF-P、IP。
proteintech 这款 66002-1-Ig,品名是 GFP tag Monoclonal antibody,Mouse / IgG2a 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、ELISA、IF/ICC、IP。
再看 abclonal 的 AE011:Rabbit anti GFP-Tag pAb,验证应用覆盖 WB、IF/ICC。
到底怎么选?
先确认你的构建用的是哪种 GFP 变体,产品是否覆盖。WB 看表达和降解,免疫荧光做定位补救,IP 拉互作蛋白。单抗背景低、批次稳,多抗信号强。如果同时用其他标签(HA、Myc),注意宿主种属错开,多重标记才好搭。
相关产品列表
| 品牌 | 货号 | 品名 | 抗原名称 |
|---|---|---|---|
| proteintech | 50430-2-AP | GFP tag Polyclonal antibody | GFP tag |
| proteintech | 66002-1-Ig | GFP tag Monoclonal antibody | GFP tag |
| abclonal | AE011 | Rabbit anti GFP-Tag pAb | GFP tag |