ERK 抗体横评:双带判读有讲究(人源/小鼠/大鼠样品)
MAPK 通路实验里,ERK1/2 大概是被跑得最多的靶点之一。WB 上的经典图景是两条紧挨的带,可磷酸化抗体一上就容易翻车:刺激时间不对、裂解液忘了加磷酸酶抑制剂,信号弱到看不见,还以为通路根本没激活。
ERK1(MAPK3)和 ERK2(MAPK1)是丝裂原活化蛋白激酶通路的执行终端,被 MEK 磷酸化后进核激活转录因子,管着增殖、分化和存活。两者分子量接近(约 44 和 42 kDa),WB 常常一起检出,所以抗体多标为 ERK1/2。研究时总蛋白和磷酸化水平要成对看。
这一组产品针对的抗原是 ERK1,反应种属:Human、Mouse、Rat。下面把各款的特点摊开讲。
各款特点,挨个说
proteintech 的 11257-1-AP(ERK1/2 Polyclonal antibody),Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA、FCM、IF/ICC。
abclonal 这款 A4782,品名是 ERK1/2 Rabbit mAb,验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA、IF/ICC。
再看 abclonal 的 AP0472:Phospho-ERK1-T202/Y204 + ERK2-T185/Y187 Rabbit pAb,验证应用覆盖 WB、ELISA、IF/ICC。
到底怎么选?
总蛋白抗体用途广,磷酸化抗体认准 Thr202/Tyr204 这类双位点表位。样品裂解必须加磷酸酶抑制剂,全程冰上操作。阳性对照用 EGF 或血清刺激几分钟的细胞最方便。定量时曝光控制在线性范围,不然两条带的比值没意义。
相关产品列表
| 品牌 | 货号 | 品名 | 抗原名称 |
|---|---|---|---|
| proteintech | 11257-1-AP | ERK1/2 Polyclonal antibody | ERK1 |
| abclonal | A4782 | ERK1/2 Rabbit mAb | ERK1 |
| abclonal | AP0472 | Phospho-ERK1-T202/Y204 + ERK2-T185/Y187 Rabbit pAb | ERK1 |