WB 内参 β-tubulin:怎么选不出错(人源/小鼠/大鼠样品)
GAPDH、actin 之外,β-tubulin 是第三大国民级内参。约 50-55 kDa 的位置不算拥挤,可它和 TUBB3 这些亚型序列同源,交叉反应一多,神经样品里的条带就乱了。还有些处理条件下 tubulin 表达并不恒定,拿来归一化前得先验证。
β-tubulin 是微管蛋白的主要亚基,和 α-tubulin 组成异二聚体搭起微管骨架,参与细胞形态、分裂和胞内运输。它在多数细胞里高表达,常被当 WB 上样对照。亚型之间同源性高,抗体到底识别哪几个亚型要看清楚。
这一组产品针对的抗原是 TUBB,反应种属:Human、Mouse、Rat。下面把各款的特点摊开讲。
各款特点,挨个说
Abcam 的 Ab21058(HRP Anti-beta Tubulin antibody - Loading Control),Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,标记形式为 HRP,验证应用覆盖 WB、IHC。
abclonal 这款 AC008,品名是 β-Tubulin Rabbit pAb,验证应用覆盖 WB、IHC、IF/ICC。
再看 abclonal 的 A12289:β-Tubulin Rabbit mAb,验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA、IP。
到底怎么选?
当内参用就选对多物种验证过的经典单抗;做骨架免疫荧光看微管网络,对固定条件验证过的抗体更稳。神经样品注意和 TUBB3 的区分,特异性验证图要看仔细。高丰度容易饱和,上样量和曝光控制在线性范围。诺考达唑解聚微管可以做阳性对照。
相关产品列表
| 品牌 | 货号 | 品名 | 抗原名称 |
|---|---|---|---|
| Abcam | Ab21058 | HRP Anti-beta Tubulin antibody - Loading Control | TUBB |
| abclonal | AC008 | β-Tubulin Rabbit pAb | TUBB |
| abclonal | A12289 | β-Tubulin Rabbit mAb | TUBB |