脂肪酸合成查 FASN:大蛋白 WB 有讲究(人源/小鼠/大鼠样品)
做肿瘤代谢、脂肪变性的同学,FASN 是脂合成的看板酶。麻烦在于它是约 270 kDa 的巨型蛋白,转膜本身就费劲,再碰上抗体不给力,跑一天胶只看到顶端一团模糊。样品降解还会出一堆小片段,判读更头大。
FASN(脂肪酸合酶)是把乙酰辅酶 A 和丙二酰辅酶 A 合成长链脂肪酸的多酶复合体,在肝、脂肪和多种肿瘤里高表达。不少肿瘤依赖它做脂质供给,抑制 FASN 的药物策略因此被反复探索。它的表达随营养状态和激素波动,比较时注意培养条件。
这一组产品针对的抗原是 FASN,反应种属:Human、Mouse、Rat。下面把各款的特点摊开讲。
各款特点,挨个说
proteintech 的 10624-2-AP(FASN Polyclonal antibody),Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA、FCM、IF/ICC。
Abcam 这款 Ab22759,品名是 Anti-Fatty Acid Synthase antibody,Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、IF/ICC。
再看 Abcam 的 Ab128870:Anti-Fatty Acid Synthase antibody [EPR7466],Rabbit / IgG 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、FCM、IF/ICC、IP。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/10000。
到底怎么选?
WB 用低浓度胶(6%-8%)并延长转膜时间,必要时湿转。选对人和小鼠样品验证过的产品。裂解加蛋白酶抑制剂,减少降解条带。机制搭配 ACC、SCD1、SREBP1 一起看脂代谢网络;IHC 看组织表达时坏死区容易非特异着色,读片要避开。
相关产品列表
| 品牌 | 货号 | 品名 | 抗原名称 |
|---|---|---|---|
| proteintech | 10624-2-AP | FASN Polyclonal antibody | FASN |
| Abcam | Ab22759 | Anti-Fatty Acid Synthase antibody | FASN |
| Abcam | Ab128870 | Anti-Fatty Acid Synthase antibody [EPR7466] | FASN |