小鼠 CD19 流式抗体:B 细胞分型怎么搭配
做 B 细胞发育、体液免疫、CAR-T 相关表型的同学,CD19 是流式面板里的常客。产品从纯化到各种荧光偶联都有,选荧光素看着简单,实际要和 B220、IgM、CD21 这些标志排兵布阵。亮度配错了,弱表达亚群直接被淹掉。
CD19 是 B 细胞谱系的表面糖蛋白,从祖 B 细胞一直表达至成熟 B 细胞阶段,和 CD21、CD81 组成共受体复合物调节 BCR 信号。它也是 CAR-T 领域最经典的靶点之一。小鼠实验里常和 B220 一起界定 B 细胞门。
这一组产品针对的抗原是 CD19,反应种属:Mouse。下面把各款的特点摊开讲。
各款特点,挨个说
BD Pharmingen 的 550992(BD Pharmingen™ APC Rat Anti-Mouse CD19),Rat LEW 来源,属单克隆抗体,标记形式为 APC,验证应用覆盖 FCM。
Abcam 这款 Ab245235,品名是 Anti-CD19 antibody [EPR23174-145],Rabbit / IgG 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、FCM、IF/ICC、MIHC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/1000。
再看 BD Pharmingen 的 553785:BD Pharmingen™ FITC Rat Anti-Mouse CD19,Rat LEW 来源,属单克隆抗体,标记形式为 FITC,验证应用覆盖 FCM。
到底怎么选?
多色面板把低表达抗原配亮荧光素(PE、APC),高表达配暗一些的通道。先核对流式仪激光配置再挑染料。直接偶联省掉二抗、批次更一致;纯化抗体适合自标或功能实验。克隆按用途选:常规分型选验证充分的,体内清除实验要挑标注适合 in vivo 的。
相关产品列表
| 品牌 | 货号 | 品名 | 抗原名称 |
|---|---|---|---|
| BD Pharmingen | 550992 | BD Pharmingen™ APC Rat Anti-Mouse CD19 | CD19 |
| Abcam | Ab245235 | Anti-CD19 antibody [EPR23174-145] | CD19 |
| BD Pharmingen | 553785 | BD Pharmingen™ FITC Rat Anti-Mouse CD19 | CD19 |