用 α-tubulin 做 WB 内参,抗体选型也有讲究(人源/小鼠/大鼠样品)
α-tubulin 做 WB 内参的频率大概仅次于 GAPDH,很多人觉得随便买一支就行。直到有一天发现条带位置偏了、信号忽强忽弱,才意识到 tubulin 家族有多个亚型,抗体识别的表位不完全一样。
TUBA4A 编码 α-tubulin 的一个亚型,和 β-tubulin 组成异源二聚体,聚合形成微管。微管是细胞骨架的"高速公路",参与细胞分裂、胞内运输和形态维持。α-tubulin 在大多数细胞里稳定高表达,所以也常被当作上样对照。但要注意它在不同细胞类型和处理条件下的表达量并非绝对不变。
这一组产品针对的抗原是 TUBA4A,反应种属:Human、Mouse、Rat。下面把各款的特点摊开讲。
各款特点,挨个说
Abcam 的 Ab18251(Anti-alpha Tubulin antibody - Loading Control),Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB、FCM、IF/ICC。
abclonal 这款 AC012,品名是 α-Tubulin Mouse mAb,验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA、IF/ICC。
到底怎么选?
做 WB 内参的话,选对多物种验证过的抗体最省心。有些 α-tubulin 抗体同时识别多个亚型(TUBA1A、TUBA1B、TUBA4A 等),条带更亮但也可能出双带。免疫荧光看微管网络需要抗体能识别天然构象。做有丝分裂研究时,磷酸化修饰可能影响表位,注意选择不受修饰影响的克隆。
相关产品列表
| 品牌 | 货号 | 品名 | 抗原名称 |
|---|---|---|---|
| Abcam | Ab18251 | Anti-alpha Tubulin antibody - Loading Control | TUBA4A |
| abclonal | AC012 | α-Tubulin Mouse mAb | TUBA4A |