His 抗体横评：融合蛋白检测怎么选

原核表达带 6×His 标签的同学，纯化完总要跑个 WB 验证一下。可 His 抗体的表现差异很大：有的只认变性蛋白，有的对天然蛋白亲和力更高，还有的会被样品里的组氨酸干扰。条带位置不对或者纯化挂不住，先别急着怪表达量。

6×His 是组氨酸串标签，靠和镍、钴这类金属离子螯合做亲和纯化，也能用抗体检测。它个头小、对蛋白功能影响相对小，是融合蛋白里最常见的标签之一。抗 His 抗体识别的是这段组氨酸串，不同克隆对串长和两侧序列的容忍度不同。

这一组产品针对的抗原是 6X His tag，反应种属：标签蛋白（无特定反应种属限制）。下面把各款的特点摊开讲。

各款特点，挨个说

Abcam 的 Ab18184（Anti-6X His tag® antibody [HIS.H8]），Mouse / IgG2b 来源，属单克隆抗体，验证应用覆盖 WB、ELISA、IF/ICC、IP、Dot。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/1000。

Abcam 这款 Ab9108，品名是 Anti-6X His tag® antibody，Rabbit / IgG 来源，属多克隆抗体，验证应用覆盖 WB、ELISA、IF/ICC、ChIP。

再看 Abcam 的 Ab1187：HRP Anti-6X His tag® antibody，Rabbit / IgG 来源，属多克隆抗体，标记形式为 HRP，验证应用覆盖 WB、ELISA。

Abcam 的 AB3553 值得单独说说——HRP Anti-6X His tag® antibody，Chicken / IgY 来源，属多克隆抗体，标记形式为 HRP，验证应用覆盖 WB、ELISA。

WB 用识别变性样品的抗体，转膜后按厂家推荐稀释。纯化流程的中间步骤可以用 dot blot 快速验证，比跑全胶省事。样品里残留的咪唑会影响部分抗体结合，检测前先透析或脱盐。融合蛋白条带按插入片段的大小算，别只按标签的分子量找。