CD3E 抗体横评:T 细胞标志的克隆怎么选(人源/小鼠/大鼠样品)
流式做 T 细胞分型,CD3 是绕不开的门。可 CD3 复合物有好几个亚基,抗体认的不是同一个东西:CD3ε 是最常见的靶点,克隆和荧光素选得不对,弱表达的亚群容易被划到阴性堆里。面板里它还常和 CD4、CD8 挤通道,排布前得先想清楚。
CD3E 编码 CD3ε 链,和 γ、δ、ζ 一起组成 T 细胞受体复合物,是 T 细胞的通用标志。小鼠 CD3ε 的常用克隆在流式、免疫荧光里都能用。胸腺细胞发育过程中它的表达强度有变化,不同阶段的信号不能横向硬比。
这一组产品针对的抗原是 CD3E,反应种属:Human、Mouse、Rat。下面把各款的特点摊开讲。
各款特点,挨个说
Abcam 的 Ab16669(Anti-CD3 epsilon antibody [SP7]),Rabbit / IgG 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、FCM、MIHC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/25-1/1000。
Abcam 这款 Ab5690,品名是 Anti-CD3 epsilon antibody,Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC。
再看 Abcam 的 Ab11089:Anti-CD3 antibody [CD3-12],Rat / IgG1 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、FCM。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/1000。
到底怎么选?
圈总 T 细胞用 CD3 单标或与 CD4、CD8 联用,先用单染管定电压。CD3 表达中等偏强,FITC、PE 起步够用,强通道留给弱表达标志。做胞内染色或石蜡切片另选对应验证的产品,流式克隆不一定通用。涉及 T 细胞激活的功能实验,注意抗体是否影响 TCR 信号,看清厂家标注。
相关产品列表
| 品牌 | 货号 | 品名 | 抗原名称 |
|---|---|---|---|
| Abcam | Ab16669 | Anti-CD3 epsilon antibody [SP7] | CD3E |
| Abcam | Ab5690 | Anti-CD3 epsilon antibody | CD3E |
| Abcam | Ab11089 | Anti-CD3 antibody [CD3-12] | CD3E |