自噬与代谢研究,mTOR 抗体选购指南(人源/小鼠样品)
mTOR 是细胞代谢的总开关,做自噬、代谢、肿瘤的同学都绕不开。但这个蛋白很大(约 289 kDa),WB 转膜本身就是个技术活,抗体再不给力,跑一天胶都白搭。磷酸化位点又多,买之前不看清楚,实验方向直接跑偏。
mTOR 是丝/苏氨酸激酶,组装成 mTORC1 和 mTORC2 两种复合物:前者响应营养和能量状态,调控蛋白合成与自噬;后者参与细胞骨架和存活信号。研究时通常关注总 mTOR 和关键位点磷酸化(如 Ser2448)。因为它分子量大,SDS-PAGE 建议用低浓度胶并延长转膜时间。
这一组产品针对的抗原是 mTOR,反应种属:Human、Mouse、Rat。下面把各款的特点摊开讲。
各款特点,挨个说
Abcam 的 Ab32028(Anti-mTOR antibody [Y391]),Rabbit / IgG 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、IP、CUT&RUN-seq。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/1000-1/5000。
Abcam 这款 Ab134903,品名是 Anti-mTOR antibody [EPR390(N)],Rabbit / IgG 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/10000。
再看 proteintech 的 66888-1-Ig:mTOR Monoclonal antibody,Mouse / IgG2a 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA、IF/ICC、IP。
proteintech 的 67778-1-Ig 值得单独说说——Phospho-mTOR (Ser2448) Monoclonal antibody,Mouse / IgG2b 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、ELISA、FCM、IF/ICC。
接下来是 abclonal 的 A2445(mTOR Rabbit pAb),验证应用覆盖 WB、ELISA、IF/ICC、IP。
到底怎么选?
总蛋白抗体看反应种属和应用验证范围;磷酸化抗体认准位点。WB 样品裂解务必加磷酸酶抑制剂。大分子量蛋白转膜条件要优化,必要时用湿转。想做激酶活性相关实验,搭配下游底物(如 S6K、4E-BP1)的磷酸化抗体一起看更有说服力。
相关产品列表
| 品牌 | 货号 | 品名 | 抗原名称 |
|---|---|---|---|
| Abcam | Ab32028 | Anti-mTOR antibody [Y391] | mTOR |
| Abcam | Ab134903 | Anti-mTOR antibody [EPR390(N)] | mTOR |
| proteintech | 66888-1-Ig | mTOR Monoclonal antibody | mTOR |
| proteintech | 67778-1-Ig | Phospho-mTOR (Ser2448) Monoclonal antibody | mTOR |
| abclonal | A2445 | mTOR Rabbit pAb | mTOR |