1. 领域背景与文献引入
文献英文标题：18F-FDG PET/CT metrics-based stratification of large B-cell lymphoma receiving CAR-T cell therapy: immunosuppressive tumor microenvironment as a negative prognostic indicator in patients with high tumor burden；发表期刊：Biomarker Research；影响因子：未公开；研究领域：大B细胞淋巴瘤（LBCL）CAR-T细胞治疗预后预测与机制研究。
嵌合抗原受体T（CAR-T）细胞治疗是复发难治LBCL患者的突破性疗法，客观缓解率（ORR）达83%，5年总生存（OS）率42%，但仍有部分患者对治疗响应差，早期识别这类患者并干预是提升疗效的关键。现有研究显示，CAR-T治疗前的18F-氟脱氧葡萄糖正电子发射计算机断层显像（18F-FDG PET/CT）指标（如总代谢肿瘤体积tMTV、最大标准化摄取值SUVmax）与患者预后相关，但单一指标的预测效能有限，且高肿瘤负荷患者响应差的机制尚未明确。在此背景下，本研究纳入90例接受CAR-T治疗的LBCL患者，系统分析筛选期、治疗后1个月（M1）及3个月的18F-FDG PET/CT指标，结合RNA测序（RNA-seq）解析高肿瘤负荷患者的免疫微环境特征，旨在构建更精准的预后预测模型，并揭示其潜在机制。
2. 文献综述解析
文献综述的核心逻辑围绕“CAR-T治疗LBCL的疗效局限→现有PET/CT指标的应用与不足→本研究的创新方向”展开：作者首先总结CAR-T细胞治疗显著改善复发难治LBCL患者预后，但约30%患者仍会早期进展，强调早期预测的必要性；接着回顾现有研究：tMTV、SUVmax等PET/CT指标可反映肿瘤负荷与代谢活性，与CAR-T治疗后的无进展生存（PFS）、OS相关，但单一指标的预测效能有限（如tMTV对部分患者的区分度不足），且未明确高肿瘤负荷患者响应差的生物学机制；最后指出本研究的创新点：①整合多个PET/CT指标（最大病灶最大直径Dmax、tMTV、总病灶糖酵解量tTLG等），优化预后预测模型；②结合RNA-seq分析高肿瘤负荷患者的肿瘤微环境（TME），探索免疫抑制性微环境对CAR-T疗效的影响。
3. 研究思路总结与详细解析
3.1 患者队列与PET/CT指标收集
实验目的是获取LBCL患者CAR-T治疗前后的PET/CT指标及临床结局，评估指标与预后的关联。方法为纳入2018年1月至2023年3月在上海瑞金医院接受CAR-T治疗的90例LBCL患者（中位年龄56.5岁，53例男性），收集筛选期（输注前中位53.5天）、M1及治疗后3个月的18F-FDG PET/CT扫描数据，提取Dmax（最大病灶的最大直径）、tMTV、tTLG、SUVmax及最远病灶距离（标准化体表面积）等指标；同时记录患者的3个月完全缓解（CR）率、PFS及OS。结果显示：筛选期Dmax<6cm的患者（60例）3个月CR率（85.0% vs 33.3%，P<0.001）、PFS（风险比HR=0.17，95%置信区间CI=0.08-0.35，P<0.001）及OS（HR=0.18，95%CI=0.08-0.40，P<0.001）显著优于Dmax≥6cm患者（30例）；tMTV、tTLG的最佳截断值分别为50cm³、500g，低于截断值的患者预后更好。
文献未提及具体PET/CT扫描仪器，领域常规使用Siemens、GE等品牌的18F-FDG PET/CT扫描仪。
3.2 预后预测模型构建
实验目的是优化PET/CT指标组合，提升预后预测效能。方法为通过单因素及多因素Logistic回归分析，评估筛选期Dmax与结外受累的组合、M1 SUVmax与tTLG清除率（ΔtTLG/tTLGpre，即筛选期与M1 tTLG的差值占筛选期tTLG的比例）的组合对预后的预测价值，并在法国里昂队列（Lyon cohort）中验证。结果显示：①筛选期Dmax结合结外受累的预测效能优于tMTV或tTLG与结外受累/乳酸脱氢酶（LDH）的组合（如Dmax<6cm且无结外受累患者的PFS显著更长）；②M1 SUVmax<8且tTLG清除率≥0.9的患者（11例）中位PFS未达到，持续缓解；而SUVmax≥8的患者，无论tTLG清除率高低，均在6个月内进展（tTLG清除率≥0.9者中位PFS 4.2个月，HR=95.0；<0.9者中位PFS 3.7个月，HR=65.2）；该模型在里昂队列中验证有效。
3.3 不良反应预测分析
实验目的是探索PET/CT指标与CAR-T治疗不良反应（细胞因子释放综合征CRS、神经毒性NT）的关联。方法为分析阿基仑赛（axi-cel）与瑞基奥仑赛（relma-cel）患者的PET/CT指标与CRS、NT的相关性。结果显示：仅axi-cel患者的最远病灶距离（标准化体表面积）与NT相关，AUC=0.74（P=0.034，95%CI=0.578-0.899）；最远病灶距离<0.15m⁻¹的患者无NT发生，而≥0.15m⁻¹者34.8%发生NT；但PET/CT指标与CRS/NT的持续时间、发作时间及CAR-T细胞扩增无显著关联。
3.4 RNA-seq与肿瘤微环境分析
实验目的是解析高肿瘤负荷（Dmax≥6cm）患者对CAR-T治疗响应差的机制。方法为对47例患者筛选期的肿瘤样本进行RNA-seq，通过基因集富集分析（GSEA）和肿瘤微环境细胞组成分析（如M2巨噬细胞、癌症相关成纤维细胞CAF、髓源性抑制细胞MDSC等），比较Dmax<6cm与≥6cm患者的差异。结果显示：Dmax≥6cm患者显著富集免疫抑制相关生物学过程（如巨噬细胞趋化、脂质代谢通路激活）；肿瘤微环境中M2巨噬细胞、CAF、MDSC的比例显著增加，中间耗竭T细胞（兼具耗竭与效应功能的T细胞亚群）增多，提示免疫抑制性微环境可能抑制CAR-T细胞的效应功能，导致疗效不佳。
文献未提及具体RNA-seq试剂盒，领域常规使用Illumina NovaSeq测序平台及TRIzol试剂提取RNA。
4. Biomarker研究及发现成果解析
4.1 Biomarker定位与筛选逻辑
本研究的Biomarker包括筛选期PET/CT指标（Dmax、tMTV、tTLG）、M1 PET/CT指标（SUVmax、tTLG清除率），筛选逻辑为：①先通过单因素分析明确单一指标（如Dmax、tMTV）与预后的关联；②再通过多因素分析优化组合指标（如Dmax结合结外受累、M1 SUVmax结合tTLG清除率）；③最后结合RNA-seq解析Biomarker的生物学意义。
4.2 研究过程与数据
- Dmax：来源于筛选期PET/CT扫描的最大病灶直径，验证方法为Kaplan-Meier生存分析及Logistic回归。数据显示：Dmax<6cm患者的3个月CR率（85.0% vs 33.3%，P<0.001）、PFS（HR=0.17，P<0.001）及OS（HR=0.18，P<0.001）显著优于Dmax≥6cm患者；其预测3个月CR率的敏感性为85.0%，特异性为66.7%。
- tMTV与tTLG：筛选期tMTV的最佳截断值为50cm³，tTLG为500g；tMTV<50cm³患者的3个月CR率（78.3% vs 40.0%，P<0.001）、PFS（HR=0.22，P<0.001）显著更优；tTLG<500g患者的结果类似。
- M1 SUVmax与tTLG清除率：M1 SUVmax<8且tTLG清除率≥0.9的患者持续缓解，而SUVmax≥8的患者早期进展，该组合在里昂队列中验证有效（AUC=0.82）。
4.3 核心成果与创新性
- 功能关联：①筛选期Dmax是预测CAR-T治疗预后的最优单一指标（AUC最大，P值最显著）；②M1 SUVmax与tTLG清除率的组合可精准预测PR/SD患者的早期进展；③axi-cel患者的最远病灶距离可预测NT发生。
- 创新性：①首次发现Dmax结合结外受累的预测效能优于现有指标组合；②构建并验证了M1 PET/CT指标的组合模型，提升了PR/SD患者的早期预测准确性；③首次通过RNA-seq揭示高肿瘤负荷患者的免疫抑制性微环境（M2巨噬细胞、CAF、MDSC增加，中间耗竭T细胞增多）是CAR-T疗效差的关键机制，为靶向免疫微环境的联合治疗提供了理论依据。
综上，本研究通过18F-FDG PET/CT指标分层LBCL患者，构建了更精准的预后预测模型，并揭示了免疫抑制性微环境在高肿瘤负荷患者中的不良预后作用，为CAR-T治疗的个体化管理及机制研究提供了重要参考。