1. 领域背景与文献引入
文献英文标题：Serum soluble CD26/DPP4 titer variation is a potential prognostic biomarker in cancer therapy with a humanized anti-CD26 antibody；发表期刊：Biomarker Research；影响因子：3.498（2021年）；研究领域：肿瘤免疫治疗中CD26靶向治疗的预后生物标志物研究。
CD26是一种110kDa的II型跨膜糖蛋白，兼具二肽基肽酶4（DPP4）活性与细胞黏附功能，在恶性间皮瘤、肾细胞癌等多种肿瘤细胞表面高表达，通过调控细胞周期、促进肿瘤-基质相互作用参与癌症进展，是肿瘤靶向治疗的重要靶点。近年来，人源化抗CD26单克隆抗体YS110的I期临床试验完成，结果显示其对CD26阳性肿瘤患者具有可控的安全性（如输注反应轻微）及初步疗效，但临床中缺乏动态预测治疗 efficacy的生物标志物，限制了精准治疗的实施。现有研究虽发现血清可溶性CD26（sCD26）与尿路上皮癌、胃癌的诊断相关，或术后sCD26变化与结直肠癌复发风险关联，但均未涉及治疗过程中sCD26动态变化与预后的关系。本研究基于YS110的I期临床试验数据，系统分析sCD26滴度变化与肿瘤应答及无进展生存期（PFS）的关联，旨在填补CD26靶向治疗预后生物标志物的研究空白。
2. 文献综述解析
文献综述围绕“CD26的生物学功能→CD26靶向治疗进展→sCD26作为生物标志物的现有研究”展开评述，通过梳理现有研究的结论与局限性，凸显本研究的创新价值。现有研究指出：① CD26通过与纤维连接蛋白结合、诱导G1/S期阻滞等机制促进肿瘤生长，是肿瘤治疗的潜在靶点；② YS110作为首个人源化抗CD26抗体，其I期试验显示对CD26阳性肿瘤患者的客观缓解率（ORR）约为15%，安全性良好；③ sCD26的基线水平可辅助诊断尿路上皮癌（AUC=0.78）、胃癌（灵敏度82%），术后sCD26升高与结直肠癌复发风险增加相关（HR=2.1，p=0.03）。但上述研究均聚焦于疾病诊断或术后监测，未涉及“治疗过程中sCD26动态变化与治疗疗效的关联”。本研究的创新点在于：首次以CD26靶向治疗药物（YS110）的临床试验为基础，动态监测患者治疗中的sCD26滴度变化，并关联临床结局（肿瘤体积变化、PFS），为CD26靶向治疗的预后评估提供了可量化的生物标志物。
3. 研究思路总结与详细解析
本研究以“探索sCD26滴度变化作为YS110治疗预后生物标志物”为目标，核心科学问题是“YS110治疗中sCD26动态变化与肿瘤应答及PFS是否相关”，技术路线遵循“临床数据收集→sCD26动态监测→统计关联分析→体外机制验证”的闭环逻辑，结合临床试验与基础实验系统验证sCD26的预后价值。
3.1 临床患者数据与样本收集
实验目的：获取YS110治疗患者的临床特征、血清样本及疗效数据，为后续分析提供基础。方法细节：纳入26例可评估的CD26阳性肿瘤患者（19例恶性间皮瘤、6例肾细胞癌、1例尿路上皮癌），记录患者年龄、性别、基线肿瘤体积、YS110剂量（0.1-6mg/kg）及给药频率（每2周1次Q2W，18例；每周1次Q1W，8例）；于治疗前（day1pre）、治疗中（day15pre/post、day29pre/post）采集血清样本，通过ELISA检测sCD26滴度，比色法检测DPP4活性；于day43通过RECIST 1.0标准评估肿瘤体积变化，随访记录PFS（中位数随访时间12个月）。结果解读：患者基线特征无明显偏倚（除性别外，女性患者SD率更高：6/8 vs 4/11，p=0.026），所有血清样本均成功检测sCD26及DPP4活性。实验所用关键产品：文献未提及具体血清检测试剂品牌，领域常规使用ELISA试剂盒检测sCD26（如R&D Systems的sCD26 ELISA Kit），DPP4活性检测试剂盒（如Abcam的DPP4 Activity Assay Kit）。
3.2 血清sCD26滴度的动态变化分析
实验目的：观察YS110给药后患者血清sCD26滴度的变化趋势。方法细节：采用箱线图分析26例患者day1、15、29pre/post的sCD26滴度变化（以day1pre为基线100%）。结果解读：所有患者的sCD26滴度在YS110给药后立即显著降低（如day1post较day1pre降低约50%，n=26，p<0.01），随后逐渐恢复，但至下次给药前（day15pre、day29pre）仍低于基线水平（day15pre约为基线的70%，day29pre约为基线的50%）；Q2W组患者的sCD26恢复趋势更明显（day29pre约为基线的60%），而Q1W组因给药频率高、剂量大（2-6mg/kg），day15pre、day29pre的sCD26滴度更低（约为基线的40%）（图1）。实验所用关键产品：同3.1。
3.3 sCD26滴度变化与临床结局的相关性分析
实验目的：验证sCD26滴度变化与肿瘤应答（SD/PD）及PFS的关联。方法细节：① 散点图分析SD（12例）与PD（11例）患者的sCD26滴度变化与肿瘤体积变化的关系；② Pearson/Spearman相关性分析sCD26变化与肿瘤体积、PFS的相关性；③ ROC曲线确定sCD26变化的cutoff值，评估其预测效能。结果解读：散点图显示，day29pre的sCD26滴度在SD患者中显著低于PD患者（SD组约为基线的30%，PD组约为基线的60%，n=23，p=0.016），且与肿瘤体积变化呈正相关（r=0.47，n=25，p=0.006）；相关性分析显示，day29pre的sCD26变化与PFS显著相关（r=0.43，n=26，p=0.011）；ROC曲线显示，day29pre的sCD26变化cutoff值为37.7%时，预测SD的AUC为1.000（p<0.001），预测PFS≥90天的AUC为0.950（p<0.001）（图2、3，表1、2）。实验所用关键产品：同3.1。
3.4 体外实验验证sCD26降低的机制
实验目的：探究YS110降低血清sCD26的细胞学机制。方法细节：选取CD26阳性的恶性间皮瘤细胞系（MSTO-CD26、JMN ctrl-shRNA）及非肿瘤细胞（TIG-1成纤维细胞、HDMVEC内皮细胞），分别加入YS110（0-10μg/ml）或对照IgG（BioLegend，货号QA16A12），培养1-7天后，通过ELISA检测上清液中的sCD26浓度。结果解读：YS110显著抑制CD26阳性细胞的sCD26分泌（如MSTO-CD26细胞加入10μg/ml YS110后，sCD26分泌减少约70%，n=4，p<0.01），且呈剂量和时间依赖性（1mg/ml YS110抑制约30%，7天培养抑制约80%）；CD26阴性细胞（MSTO parent、JMN CD26-shRNA）的sCD26分泌不受YS110影响（图4）。实验所用关键产品：对照IgG购自BioLegend（货号QA16A12），sCD26检测采用自制ELISA试剂盒（基于抗CD26单抗5F8和9C11）。
4. Biomarker研究及发现成果解析
本研究聚焦的Biomarker为血清可溶性CD26（sCD26）及关联的DPP4酶活性，通过“临床动态监测→统计关联→机制验证”的逻辑链，明确其作为YS110治疗预后生物标志物的价值。
Biomarker定位与验证逻辑
Biomarker类型为“血清可溶性蛋白标志物”（sCD26）及“酶活性标志物”（DPP4），筛选/验证逻辑为：① 从YS110的I期临床试验患者中动态监测sCD26滴度变化；② 通过统计分析关联sCD26变化与肿瘤应答（SD/PD）及PFS；③ 体外实验验证YS110对sCD26分泌的抑制作用，确认Biomarker与药物作用的因果关系。
研究过程与数据
Biomarker来源为临床患者的血清样本，验证方法包括：① ELISA定量检测sCD26滴度（检测限0.488ng/ml）；② 比色法检测DPP4活性（检测范围1-100nM/min/ml）。特异性与敏感性数据：ROC曲线显示，day29pre的sCD26变化cutoff值为37.7%时，预测SD的AUC为1.000（95% CI 1.000-1.000，p<0.001），敏感性与特异性均为100%；预测PFS≥90天的AUC为0.950（95% CI 0.850-1.000，p<0.001），预测PFS≥180天的AUC为0.879（95% CI 0.700-1.000，p=0.027）。
核心成果
- sCD26动态变化与预后的关联：day29pre的sCD26滴度在SD患者中显著低于PD患者（SD组约为基线的30%，PD组约为基线的60%，n=23，p=0.016），且与肿瘤体积变化（r=0.47，n=25，p=0.006）、PFS（r=0.43，n=26，p=0.011）显著正相关。
- Biomarker的预测效能：day29pre的sCD26变化是预测YS110疗效的强指标，cutoff值37.7%时可100%区分SD与PD患者，预测PFS≥90天的准确率达95%。
- 机制验证：YS110通过抑制CD26阳性细胞的sCD26分泌，导致血清sCD26滴度降低，且该作用依赖于CD26表达（CD26阴性细胞无此效应）。
本研究首次证明，治疗过程中sCD26的动态变化与CD26靶向治疗的疗效相关，为YS110的临床应用提供了可量化的预后指标，也为其他CD26靶向药物的生物标志物研究提供了参考。