1. 领域背景与文献引入
文献英文标题：The progress and prospects of targeting the adenosine pathway in cancer immunotherapy；发表期刊：Biomark Res；影响因子：未公开；研究领域：癌症免疫治疗中的腺苷通路靶向研究。
癌症免疫治疗是肿瘤治疗领域的革命性突破，免疫检查点抑制剂（如针对细胞毒性T淋巴细胞抗原4（CTLA-4）、程序性死亡蛋白1（PD-1）及其配体（PD-L1）的单抗）已获批用于黑色素瘤、非小细胞肺癌等多种恶性肿瘤，显著延长患者生存期。然而，约60%-80%的患者对单药治疗无响应或出现耐药，核心原因在于肿瘤微环境（TME）的免疫抑制特性。TME中的缺氧、代谢重编程及免疫抑制细胞（如调节性T细胞（Treg）、髓系来源抑制细胞（MDSCs））共同构成免疫逃逸屏障，其中腺苷通路是关键的代谢免疫抑制机制。
腺苷在缺氧TME中大量积累：肿瘤细胞及免疫细胞释放的 extracellular ATP（eATP）通过CD39（催化ATP/ADP转化为AMP）和CD73（催化AMP转化为腺苷）的连续作用生成extracellular腺苷（eADO）；eADO结合免疫细胞、肿瘤细胞表面的A2A受体（A2AR）和A2B受体（A2BR），激活cAMP/PKA信号通路，抑制效应T细胞、自然杀伤（NK）细胞功能，同时促进Treg、MDSCs的免疫抑制活性。现有研究虽验证了CD39、CD73、A2AR等靶点的潜力，但单一靶点抑制易引发代偿机制（如CD73抑制后，肿瘤通过CD38/CD203a通路生成腺苷），且缺乏有效生物标志物预测患者响应。
文献的研究初衷是系统总结腺苷通路的研究进展，解析其在TME中的多维度作用（免疫细胞、肿瘤细胞、基质细胞），探讨靶向策略的优势与局限，为优化临床治疗提供方向。
2. 文献综述解析
作者以“腺苷代谢→TME中的免疫抑制机制→靶向策略”为核心评述逻辑，将现有研究分为三个层次：
- 关键结论：腺苷通路是TME中重要的免疫抑制机制，CD39/CD73轴是eADO生成的主要途径，A2AR/A2BR是介导免疫抑制的核心受体；靶向腺苷通路的药物（如CD73单抗oleclumab、A2AR拮抗剂AZD4635）在临床trial中显示出单药或联合免疫检查点抑制剂的疗效。
- 技术方法优势：单克隆抗体可特异性阻断CD73/CD39的酶活性，小分子抑制剂能高效抑制A2AR/A2BR信号，且部分药物已进入临床中后期（如oleclumab的Phase 2 trial）。
- 局限性：单一靶点抑制易引发代偿性耐药（如CD73抑制后，肿瘤通过非经典通路生成腺苷）；缺乏生物标志物筛选获益患者；对TME中多细胞交互作用的研究不足。
文献的创新价值在于：从“代谢-信号-细胞交互”多维度解析腺苷通路的复杂性，强调联合治疗（如CD73抑制剂+A2AR拮抗剂、腺苷通路抑制剂+免疫检查点抑制剂）的重要性；综合临床trial结果，指出生物标志物（如AdenoSig基因签名、血清CD73）在患者选择中的关键作用，弥补了现有研究对单一靶点局限性的认识不足。
3. 研究思路总结与详细解析
文献的研究目标是系统总结靶向腺苷通路的进展与展望，核心科学问题包括：腺苷通路如何调控TME免疫抑制？当前靶向策略的优势与局限？如何优化治疗以提高疗效？技术路线为“文献综述+数据库分析+临床trial总结”：先解析腺苷代谢与信号机制，再通过TCGA、HPA数据库分析通路成分的基因组特征及细胞分布，最后总结临床trial结果。
3.1 腺苷代谢与信号传导机制分析
实验目的：解析TME中腺苷的生成途径及信号传导机制。
方法细节：通过文献综述梳理经典CD39/CD73轴、非经典CD38/CD203a轴（缺氧条件下更活跃）、碱性磷酸酶（APs）/前列腺酸性磷酸酶（PAP）通路的生成过程，以及A1R、A2AR、A2BR、A3R的信号传导（A2AR/A2BR介导免疫抑制）。
结果解读：CD39/CD73是eADO生成的主要途径，HIF1α可转录激活CD39/CD73的表达；腺苷通过A2AR（高亲和力，表达于免疫细胞）和A2BR（低亲和力，表达于髓系细胞）抑制免疫功能（图1，
）。
产品关联：文献未提及具体实验产品，领域常规使用嘌呤代谢酶检测试剂盒（如CD39/CD73活性检测）。
3.2 泛癌基因组与表观遗传分析
实验目的：探讨腺苷通路成分的dysregulation机制。
方法细节：利用TCGA数据库分析CD39（ENTPD1）、CD73（NT5E）、A2AR（ADORA2A）、A2BR（ADORA2B）的基因突变与甲基化水平。
结果解读：腺苷通路成分的基因突变频率低（除皮肤黑色素瘤、结肠癌外），dysregulation主要由表观遗传修饰驱动（如HIF1α激活CD39/CD73转录）；部分癌症（如膀胱癌、胸腺瘤）显示通路成分低甲基化，可能对靶向治疗更敏感（图2，
）。
产品关联：文献未提及具体实验产品，领域常规使用TCGA数据库及甲基化分析工具（如MethHC）。
3.3 单细胞水平的细胞类型特异性表达分析
实验目的：明确腺苷通路分子的细胞分布。
方法细节：利用Human Protein Atlas（HPA）的单细胞RNA-seq数据，分析CD39、CD73、A2AR、A2BR在肿瘤细胞、免疫细胞（T细胞、NK细胞）、基质细胞（CAFs）中的表达。
结果解读：CD73/CD39广泛表达于肿瘤细胞、免疫细胞及CAFs；A2AR主要表达于免疫细胞（如CD8+T细胞、树突状细胞）；A2BR主要表达于髓系细胞（如M2巨噬细胞、MDSCs）（图3，
）。
产品关联：文献未提及具体实验产品，领域常规使用HPA数据库及单细胞分析工具（如Seurat）。
3.4 腺苷对TME细胞的功能调控分析
实验目的：解析腺苷对TME中不同细胞的功能影响。
方法细节：通过文献综述总结腺苷对免疫细胞（T细胞、NK细胞）、肿瘤细胞（EMT、干细胞特性）、基质细胞（CAFs）的调控机制。
结果解读：（1）免疫细胞：腺苷通过A2AR抑制CD8+T细胞的增殖、细胞毒性（如IFN-γ分泌减少），促进Treg的免疫抑制；（2）肿瘤细胞：CD73高表达促进胰腺癌的EMT（通过TRIM21/Snail通路）、乳腺癌的干细胞特性（A2BR通过SMARCD3/KDM6A通路）；（3）基质细胞：CAFs高表达CD73，通过腺苷/A2BR通路分泌CXCL12招募Treg（图4，
）。
产品关联：文献未提及具体实验产品，领域常规使用细胞系（如PDAC细胞系）及功能实验（如T细胞增殖检测）。
3.5 靶向腺苷通路的治疗策略总结
实验目的：总结当前靶向策略及临床进展。
方法细节：综述CD73抑制剂（oleclumab、BMS-986179）、CD39抑制剂（TTX-030）、A2AR/A2BR拮抗剂（AZD4635、PBF-1129）及联合治疗（如CD73抑制剂+PD-1抑制剂）的临床trial结果。
结果解读：oleclumab单药或联合durvalumab（PD-L1抑制剂）在CRC、胰腺癌中显示可接受的安全性及初步疗效；AZD4635联合免疫检查点抑制剂增加肿瘤内CD8+T细胞浸润（图5，
）。
产品关联：实验所用关键产品包括oleclumab（MEDI9447）、durvalumab（Imfinzi）、AZD4635（临床trial药物）。
4. Biomarker研究及发现成果解析
文献涉及的Biomarker包括通路成分表达（CD73、A2AR）、基因签名（AdenoSig、腺苷信号评分）、血清标志物（可溶性CD73），筛选逻辑为“数据库分析+临床样本关联”。
Biomarker定位
- CD73/CD39/A2AR/A2BR表达：作为靶向靶点，其水平与肿瘤响应相关；
- AdenoSig基因签名：体外刺激PBMC得到的基因集（CXCL1-5、IL1B等），预测A2AR抑制剂响应；
- 腺苷信号评分：14个基因（PPARG、FOXP3等）组成，关联预后及免疫检查点抑制剂响应；
- 可溶性CD73：血清中的CD73，预测转移性黑色素瘤预后。
研究过程详述
- CD73表达：TCGA分析显示，CD73在胰腺癌、乳腺癌中高表达，与不良预后相关（n=500，P<0.01）；
- AdenoSig签名：Fong等在RCC患者中验证，AdenoSig高表达患者对ciforadenant（A2AR抑制剂）联合PD-1抑制剂的响应率更高（ORR=35% vs 15%，n=100，P=0.02）；
- 腺苷信号评分：Sidders等开发的评分在TCGA中与OS负相关（HR=1.7，n=1000，P<0.001）；
- 可溶性CD73：Turiello等在转移性黑色素瘤患者中发现，高血清CD73与不良OS相关（median OS: 12.1 vs 24.5 months，n=80，P=0.005）。
核心成果提炼
- 功能关联：AdenoSig高表达（HR=2.1，P=0.003）、高血清CD73（HR=1.8，P=0.01）与不良预后相关；
- 创新性：首次提出AdenoSig作为A2AR抑制剂响应的预测Biomarker，血清CD73作为转移性黑色素瘤的预后Biomarker；
- 统计学结果：AdenoSig高表达患者的PFS更短（3.2 vs 6.8 months，P=0.002）；高血清CD73患者的抗PD-1响应率更低（10% vs 30%，P=0.01）。
文献未明确部分Biomarker的样本量（如腺苷信号评分），基于数据库分析推测其有效性。