COL1A1 抗体横评:组织染色和 WB 各有难点(人源/小鼠/大鼠样品)
做纤维化、组织修复、肿瘤基质的同学,I 型胶原染色是绕不开的。但它是个巨大的分泌型蛋白,在组织里交联成纤维,WB 提取难、IHC 背景高,抗体不给力的话,染出来的东西不是太淡就是糊成一片。
COL1A1 编码 I 型胶原的 α1 链,和 α2 链组成三螺旋结构,是骨、皮肤、肌腱等结缔组织的主要成分。在肝纤维化、肺纤维化、心肌重构等病理过程中,COL1A1 表达显著上调,是判断纤维化程度的经典指标。WB 中前胶原约 140 kDa,成熟胶原因交联常跑在胶顶或高分子区域。
这一组产品针对的抗原是 COL1A1,反应种属:Human、Mouse、Rat。下面把各款的特点摊开讲。
各款特点,挨个说
Abcam 的 Ab260043(Anti-Collagen I antibody [EPR22894-89]),Rabbit / IgG 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IP。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/1000。
abclonal 这款 A1352,品名是 Collagen I/COL1A1 Rabbit pAb,验证应用覆盖 WB、IHC、ELISA、IF/ICC。
到底怎么选?
IHC 选对石蜡切片验证过的抗体,注意有些克隆只识别变性胶原、有些识别天然三螺旋。WB 提取建议用胃蛋白酶或胶原酶消化前处理,直接 RIPA 裂解可能提不出来。做纤维化定量时,天狼星红染色和 COL1A1 免疫组化配合,结论更扎实。宿主选兔源单抗通常背景更可控。
相关产品列表
| 品牌 | 货号 | 品名 | 抗原名称 |
|---|---|---|---|
| Abcam | Ab260043 | Anti-Collagen I antibody [EPR22894-89] | COL1A1 |
| abclonal | A1352 | Collagen I/COL1A1 Rabbit pAb | COL1A1 |