自噬研究绕不开的 ATG5:抗体怎么挑(人源/小鼠/大鼠样品)
做自噬的同学,ATG5 大概是继 LC3 之后用得最多的指标。它的独特之处在于要看两个东西:游离的 ATG5 和 ATG5-ATG12 共轭物。两条带分不清楚,自噬状态就判断不了。
ATG5 是自噬体膜延伸阶段的关键蛋白,和 ATG12 共价结合后,再与 ATG16L1 组成复合物,促进 LC3 脂化(LC3-I 转 LC3-II)。WB 上游离 ATG5 约 55 kDa,ATG5-ATG12 共轭物约 62 kDa,两条带的比例变化能反映自噬通路的活跃程度。
这一组产品针对的抗原是 ATG5,反应种属:Human、Mouse、Rat。下面把各款的特点摊开讲。
各款特点,挨个说
Abcam 的 Ab108327(Anti-APG5L/ATG5 antibody [EPR1755(2)]),Rabbit / IgG 来源,属单克隆抗体,验证应用覆盖 WB、IHC、IF/ICC、IP。厂家给到的 WB 推荐稀释是 1/1000-1/10000。
proteintech 这款 10181-2-AP,品名是 ATG5 Polyclonal antibody,Rabbit / IgG 来源,属多克隆抗体,验证应用覆盖 WB、ELISA、IP。
到底怎么选?
WB 是最常用的应用,注意跑胶条件要能分开 55 和 62 kDa 两条带。阳性对照用自噬诱导(如饥饿、雷帕霉素)和抑制(如 Bafilomycin A1)处理的细胞。做自噬流评估时,ATG5 要搭配 LC3-II/p62 一起看,单看一个指标很容易误判。免疫荧光和 IHC 验证数据相对少,选之前先确认厂家做过。
相关产品列表
| 品牌 | 货号 | 品名 | 抗原名称 |
|---|---|---|---|
| Abcam | Ab108327 | Anti-APG5L/ATG5 antibody [EPR1755(2)] | ATG5 |
| proteintech | 10181-2-AP | ATG5 Polyclonal antibody | ATG5 |