CD31 只做 IHC，别拿它去跑 WB

Anti-CD31 antibody，兔多抗，只做 IHC 的血管标记

肿瘤切片上数血管，CD31 是最常用的标记。

一圈棕色围着管腔，数出来的微血管密度就是抗血管生成药效的读数。

但有人拿同一支抗体去做 WB，跑出来一片空白。原因写在说明书里，只是没看。

它的验证范围很窄

Ab28364，兔多克隆，靶点 Pecam1，也就是 CD31。

反应种属只写了人。应用只写了 IHC，厂家说明里进一步说明是 IHC-P 有验证数据。

窄不是缺点，是实话。很多抗体标着五六个应用、七八个种属，实际有数据的只有一两个。这支只报它做过的。

CD31 的验证应用集中在 IHC，WB 上没有数据。拿它去跑 WB，做不出来是正常的，不是抗体坏了。

为什么 WB 不行

CD31 是跨膜糖蛋白，胞外区高度糖基化，分子量在 130 kDa 上下浮动，实际条带位置经常偏离预测值。

更重要的是，这支抗体的表位可能在天然构象下才暴露。WB 变性之后表位消失，条带自然出不来。

做血管相关的 WB，通常换用其他克隆或者别的内皮标记，比如 CD34 或者 vWF。

数血管的几个规范

第一，热点区选择。肿瘤边缘和内部血管密度差别很大，两组要分开统计。

第二，单血管计数标准。任何染成棕色的内皮细胞或者细胞簇，与周围组织分界清楚，单独计数。管腔有没有红细胞不影响判定。

第三，视野数。通常取五个高倍视野取平均，视野选择要随机，不能挑血管多的地方。

第四，盲法。读片的人不知道分组，这一条写进方法学。

修复和显色

IHC-P 需要热抗原修复，柠檬酸或者 EDTA 都可以，具体哪个更好要自己验证一次。

DAB 显色时间要控住。显过头，背景变深，小血管会被淹没。显不足，细小的毛细血管漏掉。

同一批实验用同一个显色时间，比优化出最好的时间更重要。

血管密度这种事，一致性比绝对值值钱。

关键参数

反应种属	Human
抗原名称	Pecam1
验证应用	IHC
宿主/亚型	Rabbit / IgG
抗体类型	Polyclonal
纯化方式	Affinity purification Immunogen
储存条件	短期 +4°C；长期 +4°C

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品牌	货号	品名
Abcam	Ab28364	Anti-CD31 antibody 本文产品
Abcam	Ab182981	Anti-CD31 antibody [EPR17259]
Abcam	Ab9498	Anti-CD31 antibody [JC/70A]
Abcam	Ab24590	Anti-CD31 antibody [P2B1]

参数与产品价格以生知库产品页实时信息为准。文中实验图片取自厂家官网产品页，仅用于说明该抗体的验证情况。