换个物种,内参就得重挑
Beta Actin Monoclonal antibody,十个种属通用

从大鼠换到斑马鱼,内参抗体不一定跟着走。
很多内参抗体的种属覆盖只有人和小鼠。做鸡胚、做猪模型、做斑马鱼,条带要么不出,要么出来一条位置不对的杂带。
买之前先看种属表,比看价格重要。
这支的覆盖面
66009-1-Ig,小鼠单克隆,IgG2b 亚型,靶点 Beta Actin。
反应种属列了十个,人、小鼠、大鼠、兔、鸡、狗、猪、猴、仓鼠、斑马鱼。
哺乳动物、禽类、鱼类都在内。一个实验室做多个模型,不用为每个物种配一支内参。
应用覆盖 WB、IHC、ELISA、FCM、IF/ICC、IF-P、IP 七个方向。IF-P 是石蜡切片的免疫荧光,这个方向不是所有 actin 抗体都做过验证。
跨物种用一支内参,省的是采购和验证两件事。换模型不用换抗体,前面摸出来的条件能接着用。
跨物种用之前先比对序列
抗体识别的是表位,表位在物种之间不一定保守。
人、小鼠、大鼠的 β-actin 序列高度保守,多数抗体都能通用。鸡和斑马鱼的差异大一些,能不能用不能只看说明书上的种属列表。
稳妥做法是查一下目标物种的序列,确认抗体说明书里标注的免疫原区域是否一致。
actin 家族不止一个成员
哺乳动物至少有六个 actin 异构体。α 主要在肌肉,β 和 γ 在非肌肉细胞里。
骨骼肌样本里,γ-actin 的表达量不低。抗体如果识别保守区,会同时染上,出现双带。
平滑肌样本里,α-SMA 和 actin 的序列同源性高,某些 actin 抗体会一起认上,跑出来的条带就不止一条。
做特殊组织的时候,先跑一块长胶,把条带位置看清楚。
一个务实的建议
内参换物种的时候,不要只换抗体,上样量也要重新定。
不同物种的细胞大小、总蛋白提取效率不一样。沿用原来的上样量,内参深浅会差出一截,后面的比较全都不成立。
内参这件事,稳比灵敏更重要。
关键参数
| 反应种属 | Human, Mouse, Rat, Rabbit, Chicken, Dog, Pig, Monkey, Hamster, Zebrafish |
| 抗原名称 | Beta Actin |
| 验证应用 | WB, IHC, ELISA, FCM, IF/ICC, IF-P, IP |
| 偶联标记 | Unconjugated |
| 宿主/亚型 | Mouse / IgG2b |
| 抗体类型 | Monoclonal |
| 纯化方式 | Protein A purification |
| 储存条件 | Store at -20°C. Stable for one year after shipment. Aliquoti |
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| 品牌 | 货号 | 品名 |
|---|---|---|
| proteintech | 66009-1-Ig | Beta Actin Monoclonal antibody 本文产品 |
| proteintech | 20536-1-AP | Beta Actin Polyclonal antibody |
| proteintech | 60008-1-Ig | Beta Actin Monoclonal antibody |
| proteintech | 81115-1-RR | Beta Actin Recombinant monoclonal antibody |
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