一支国产内参,六个种属通吃

产品性能解析 · proteintech

一支国产内参,六个种属通吃

GAPDH Monoclonal antibody,六个种属,八个应用方向

proteintech  ·  货号 60004-1-Ig

一支国产内参,六个种属通吃

实验室的 GAPDH 抗体,通常是第一批买进来、之后再也没换过的东西。

换一次要重新摸浓度,重新验证条带,还要担心历史数据可比性。所以哪怕背景有点高、批间有点飘,多数人选择忍。

其实换一支的成本,比忍着做三个月重复实验低得多。

Western blot 验证结果
图 1 Western blot 验证结果(图源:proteintech 官网产品页)

内参的问题往往不是特异

GAPDH 在几乎所有细胞里高表达,抗体只要别太差,条带都能出来。

真正的差别在三点。稀释比能拉到多高,背景有多干净,不同样本类型之间的稳定性。

这三点决定了它能不能撑起一个每天都要用的位置。

这支的参数

60004-1-Ig,小鼠单克隆,IgG2b 亚型。

反应种属列了六个,人、小鼠、大鼠、猪、酵母、斑马鱼。跨物种做比较,或者用斑马鱼这类非常规模型,选择面会宽一些。

应用覆盖 WB、IHC、ELISA、FCM、IF/ICC、IP 六个方向。一支抗体能从裂解液一直用到流式管,省掉不少采购流程。

厂家在说明里写得挺实。GAPDH 分子量 36 kDa,学名甘油醛-3-磷酸脱氢酶,参与糖酵解,也是常被拿来做内参的管家蛋白。这些是常识,但说明书写清楚,说明它不打算含糊。

单克隆的好处是批间稳定。GAPDH 这种天天用的抗体,最怕换批之后条带深浅变了,前面的定量全得重来。

内参也要跟着样本走

GAPDH 不是绝对不变。

缺氧、糖代谢干预、某些药物处理,都会让 GAPDH 的表达发生位移。做这类课题,用 GAPDH 当内参,本身的假设就站不住。

稳妥的做法是同时跑两个内参,比如 GAPDH 加 β-actin,两个都稳,结论才稳。

只有一个内参的时候,至少把上样前的定量做准。这一步花的时间,比后面解释异常数据省得多。

一支抗体该有的样子

浓度写清楚,种属写清楚,验证过哪些应用写清楚。

剩下的靠数据说话。同一个批号跑够多的样本,条带深浅是否一致,比任何描述都实在。

内参这种天天要用的东西,值得多一个备选。

关键参数

反应种属 Human, Mouse, Rat, Pig, Yeast, Zebrafish
抗原名称 GAPDH
验证应用 WB, IHC, ELISA, FCM, IF/ICC, IP
偶联标记 Unconjugated
宿主/亚型 Mouse / IgG2b
抗体类型 Monoclonal
纯化方式 Protein A purification
储存条件 Store at -20°C. Stable for one year after shipment. Aliquoti
Western blot 验证结果
图 2 Western blot 验证结果(图源:proteintech 官网产品页)

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品牌 货号 品名
proteintech 60004-1-Ig GAPDH Monoclonal antibody 本文产品
proteintech 10494-1-AP GAPDH Polyclonal antibody
abclonal AC002 GAPDH Mouse mAb
abclonal A19056 GAPDH Rabbit mAb(High Dilution)

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