一支国产内参,六个种属通吃
GAPDH Monoclonal antibody,六个种属,八个应用方向

实验室的 GAPDH 抗体,通常是第一批买进来、之后再也没换过的东西。
换一次要重新摸浓度,重新验证条带,还要担心历史数据可比性。所以哪怕背景有点高、批间有点飘,多数人选择忍。
其实换一支的成本,比忍着做三个月重复实验低得多。
内参的问题往往不是特异
GAPDH 在几乎所有细胞里高表达,抗体只要别太差,条带都能出来。
真正的差别在三点。稀释比能拉到多高,背景有多干净,不同样本类型之间的稳定性。
这三点决定了它能不能撑起一个每天都要用的位置。
这支的参数
60004-1-Ig,小鼠单克隆,IgG2b 亚型。
反应种属列了六个,人、小鼠、大鼠、猪、酵母、斑马鱼。跨物种做比较,或者用斑马鱼这类非常规模型,选择面会宽一些。
应用覆盖 WB、IHC、ELISA、FCM、IF/ICC、IP 六个方向。一支抗体能从裂解液一直用到流式管,省掉不少采购流程。
厂家在说明里写得挺实。GAPDH 分子量 36 kDa,学名甘油醛-3-磷酸脱氢酶,参与糖酵解,也是常被拿来做内参的管家蛋白。这些是常识,但说明书写清楚,说明它不打算含糊。
单克隆的好处是批间稳定。GAPDH 这种天天用的抗体,最怕换批之后条带深浅变了,前面的定量全得重来。
内参也要跟着样本走
GAPDH 不是绝对不变。
缺氧、糖代谢干预、某些药物处理,都会让 GAPDH 的表达发生位移。做这类课题,用 GAPDH 当内参,本身的假设就站不住。
稳妥的做法是同时跑两个内参,比如 GAPDH 加 β-actin,两个都稳,结论才稳。
只有一个内参的时候,至少把上样前的定量做准。这一步花的时间,比后面解释异常数据省得多。
一支抗体该有的样子
浓度写清楚,种属写清楚,验证过哪些应用写清楚。
剩下的靠数据说话。同一个批号跑够多的样本,条带深浅是否一致,比任何描述都实在。
内参这种天天要用的东西,值得多一个备选。
关键参数
| 反应种属 | Human, Mouse, Rat, Pig, Yeast, Zebrafish |
| 抗原名称 | GAPDH |
| 验证应用 | WB, IHC, ELISA, FCM, IF/ICC, IP |
| 偶联标记 | Unconjugated |
| 宿主/亚型 | Mouse / IgG2b |
| 抗体类型 | Monoclonal |
| 纯化方式 | Protein A purification |
| 储存条件 | Store at -20°C. Stable for one year after shipment. Aliquoti |
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| 品牌 | 货号 | 品名 |
|---|---|---|
| proteintech | 60004-1-Ig | GAPDH Monoclonal antibody 本文产品 |
| proteintech | 10494-1-AP | GAPDH Polyclonal antibody |
| abclonal | AC002 | GAPDH Mouse mAb |
| abclonal | A19056 | GAPDH Rabbit mAb(High Dilution) |
参数与产品价格以生知库产品页实时信息为准。文中实验图片取自厂家官网产品页,仅用于说明该抗体的验证情况。