三标的时候，鸡抗体能救场
Anti-GFP antibody，鸡源 IgY，多标实验的备用通道
做三标，通道永远不够。
一抗是兔的，二抗占了 488。另一支一抗是小鼠的，二抗占了 594。第三支还是兔的，只剩 647，但两个兔源一抗会串。
把第三支换成鸡源，问题就没了。二抗用抗鸡 IgY，和抗兔、抗小鼠的 Fc 段不打架。
为什么鸡源能省一个通道
鸡的免疫球蛋白是 IgY，不是 IgG。重链结构跟哺乳动物差得远，抗鸡二抗不会识别兔或小鼠的 Fc。
鸡抗体还有个好处，它不太结合哺乳动物的类风湿因子和补体，做组织切片时非特异背景往往更低。
代价是可选范围小。鸡源抗体在整体市场上是少数，做多标的实验室才常备。
GFP 这支
Ab13970 是鸡多克隆，抗 GFP。
应用是 WB 和 IF/ICC，厂家说明里写明这两项有验证数据。
鸡 IgY 的重链结构和哺乳动物 IgG 差别大，抗哺乳动物 IgG 的二抗基本不认它。多标时通道不够，把它插进来，不用重新配一整套二抗。
GFP 抗体用得最多的场景，是验证融合蛋白有没有表达、定位对不对。这类实验对特异性的要求比定量高，鸡多抗在这件事上够用。
融合蛋白的三个坑
第一，标签被包埋。GFP 折叠完成之后，抗体识别的表位可能朝向蛋白内部。换 N 端和 C 端两种构建，往往只有一个能染上。
第二，过表达量太高。荧光本身足够亮的时候，抗体染出来的信号会被掩盖，看到的全是假象。
第三，固定方式。多聚甲醛固定对 GFP 的荧光有淬灭，甲醇固定保荧光但破坏部分表位。做抗体染色，用多聚甲醛加通透更稳。
别把 IgY 当 IgG 用
抗鸡二抗的选择比抗兔少，碰上多标组合要先确认货期。
稀释比按抗鸡二抗的说明走，不能照搬抗兔的经验值，两者效价差别不小。
通道不够的时候，换物种比换显微镜便宜。
关键参数
| 抗原名称 | GFP |
| 验证应用 | WB, IF/ICC |
| 宿主/亚型 | Chicken / IgY |
| 抗体类型 | Polyclonal |
| 储存条件 | 短期 +4°C；长期 -20°C |
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| 品牌 | 货号 | 品名 |
|---|---|---|
| Abcam | Ab13970 | Anti-GFP antibody 本文产品 |
| Abcam | Ab290 | Anti-GFP antibody |
| Abcam | Ab6556 | Anti-GFP antibody |
| Abcam | Ab6673 | Anti-GFP antibody |
参数与产品价格以生知库产品页实时信息为准。文中实验图片取自厂家官网产品页，仅用于说明该抗体的验证情况。