GAPDH 也会变,别太信内参
处理组的目的条带亮了三倍。
三标的时候,鸡抗体能救场
做三标,通道永远不够。
一支国产内参,六个种属通吃
实验室的 GAPDH 抗体,通常是第一批买进来、之后再也没换过的东西。
二抗不必那么浓
一支二抗用半年,不是因为耐用,是因为每次都加太多。
β-actin 跑出两条带,别急着扔抗体
四十二 kDa 附近,本该是一条干净的黑带。
荧光一照全是绿的,先算算二抗浓度
荧光显微镜下,视野是均匀的绿。
ChIP 拉不下来,可能卡在超声那一步
交联、裂解、超声、离心、取上清、加抗体、过夜、洗珠子、解交联、跑 qPCR。
Ki67 染不出来,八成不是抗体的问题
切片脱蜡、水化、抗原修复、封闭、一抗过夜。
显影背景一片灰,先别急着换一抗
凌晨一点,曝光三十秒。膜上除了目标条带,还有一整片灰。
内参条带不该是每天的开盲盒
跑完胶,转完膜,显影。目的条带挺漂亮。