一支抗体，从 WB 用到免疫共沉淀
Anti-GAPDH [EPR16891]，兔单抗，七个种属
WB 稀释一万倍，流式稀释一千八百倍，IP 用一比六十。
同一支抗体，三个数量级的差距。一支能顶三支用，但不能拿 WB 的习惯去配 IP。
稀释比跨度大，说明什么
滴度高。
EPR16891 是兔单克隆，Abcam 的兔单抗平台产品。单克隆的好处是批间差异小，同一支用三年，结果基本一致。
跨度大也有代价。稀释比写的是范围，具体用哪一档，得看样本里的丰度。GAPDH 是高丰度蛋白，能拉得很稀。低丰度靶点照搬这个稀释比，大概率染不出来。
这支的完整参数
Ab181602，靶点 GAPDH，兔单克隆。
反应种属列了七个，人、小鼠、大鼠、鸡、猴、鱼、热带爪蟾。跨物种的覆盖面比一般内参宽。
应用覆盖 WB、IHC、FCM、IF/ICC、IP。条件是，IHC-P 稀释 1/2000，修复用 Tris-EDTA pH 9.0 做热修复。WB 用 1/10000。ICC/IF 用 1/500。流式胞内染色 1/180。IP 用 1/60。
流式那一条还提示了同型对照，用兔单克隆 IgG 更合适。
同一支抗体跨 WB 和 IP 用，浓度差三个数量级。这不是标注错误，是两种实验的抗体需求量本来就不同。
IP 用内参，图什么
GAPDH 除了做内参，也是常用的 IP 对照。
拉一个未知蛋白，同时拉 GAPDH，如果两个泳道里都出现了同样的杂带，说明杂带来自非特异结合，不是真的互作。
这个对照比 IgG 对照更贴近真实样本，因为它证明的是"在同样的裂解液里，抗体拉下来的东西不一样"。
别忽略修复条件的差异
IHC 用 Tris-EDTA pH 9.0，很多实验室习惯用柠檬酸 pH 6.0。
换修复液，阳性强度和背景都会变。这支抗体的说明书指定了 pH 9.0，照做省事。
一支抗体能覆盖多少应用，直接决定采购单有多长。
关键参数
| 反应种属 | Human, Mouse, Rat, Chicken, Monkey, Fish, Xenopus tropicalis |
| 抗原名称 | GAPDH |
| 验证应用 | WB, IHC, FCM, IF/ICC, IP |
| 宿主/亚型 | Rabbit / IgG |
| 抗体类型 | Monoclonal |
| 纯化方式 | Affinity purification Protein A |
| 推荐稀释 | IHC-P 1/2000 Perform heat-mediated antigen retrieval with Tris/EDTA buffer pH 9.0 before commencing with IHC staining protocol.；WB 1/10000；ICC/IF 1/500；Flow Cyt (Intra) 1/180 ab172730 - Rabbit monoclonal IgG, is suitable for use as an isotype control with this antibody. |
| 储存条件 | 短期 +4°C；长期 -20°C |
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参数与产品价格以生知库产品页实时信息为准。文中实验图片取自厂家官网产品页，仅用于说明该抗体的验证情况。