α-SMA 染到血管壁,不一定是阳性

产品性能解析 · Abcam

α-SMA 染到血管壁,不一定是阳性

Anti-alpha smooth muscle Actin,兔多抗,WB 与 IHC 通用

Abcam  ·  货号 Ab5694

α-SMA 染到血管壁,不一定是阳性

纤维化模型做出来,切片 DAB 显色。

视野里血管壁一圈亮得刺眼,间质里也有棕色的条索。你很高兴,觉得模型成立。

审稿人第一句话会问,你怎么排除血管平滑肌的着色。

免疫组化 验证结果
图 1 免疫组化 验证结果(图源:Abcam 官网产品页)

这支抗体认两种细胞

α-SMA 是平滑肌肌动蛋白,编码基因 ACTA2。

血管壁的中膜是平滑肌细胞,它们高表达 α-SMA。活化的肌成纤维细胞也高表达 α-SMA。两者在切片上都呈棕褐色胞浆着色,形态上又常常挨着。

不做区分,统计出来的纤维化面积里会混进大量血管。

怎么分开

第一,看形态。血管平滑肌围着管腔排成环状或者纵行,肌成纤维细胞是散在的梭形,走向跟胶原纤维一致。

第二,看位置。离血管壁超过一定距离的区域再统计。设定一个固定距离,写进方法,比如三个血管直径之外。

第三,加标记。CD31 标内皮,desmin 标平滑肌,双标之后再看 α-SMA 的分布,归属会清楚很多。

这支的参数

Ab5694 是兔多克隆,靶点 ACTA2,识别人和小鼠。

应用是 WB 和 IHC,厂家说明里写到 IHC-P 有验证数据。

做纤维化课题,α-SMA 的阳性细胞归属比阳性强度更重要。血管壁的平滑肌细胞本来就高表达,不加其他标记,很容易把它算进肌成纤维细胞里。

多抗识别多个表位,对不同固定方式和修复条件的兼容性通常比单抗宽。做石蜡切片,这是优点。

定量的坑

视野挑在血管密集区,阳性面积会虚高。

随机取样,避开大血管,或者把血管区和间质区分开统计,两组数据分别报。

阳性面积的阈值也要固定。同一个实验室不同人调阈值,结果能差出一倍。

胶原和 α-SMA 一起看,比只看 α-SMA 更接近纤维化的真实情况。

关键参数

反应种属 Human, Mouse
抗原名称 ACTA2
验证应用 WB, IHC
宿主/亚型 Rabbit / IgG
抗体类型 Polyclonal
纯化方式 Affinity purification Immunogen
储存条件 短期 +4°C;长期 -20°C
免疫组化 验证结果
图 2 免疫组化 验证结果(图源:Abcam 官网产品页)

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品牌 货号 品名
Abcam Ab5694 Anti-alpha smooth muscle Actin antibody 本文产品
abclonal A17910 α-Smooth Muscle Actin (ACTA2) Rabbit mAb
Abcam Ab7817 Anti-alpha smooth muscle Actin antibody [1A4]
Abcam Ab124964 Anti-alpha smooth muscle Actin antibody [EPR5368]

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