α-SMA 染到血管壁,不一定是阳性
Anti-alpha smooth muscle Actin,兔多抗,WB 与 IHC 通用

纤维化模型做出来,切片 DAB 显色。
视野里血管壁一圈亮得刺眼,间质里也有棕色的条索。你很高兴,觉得模型成立。
审稿人第一句话会问,你怎么排除血管平滑肌的着色。
这支抗体认两种细胞
α-SMA 是平滑肌肌动蛋白,编码基因 ACTA2。
血管壁的中膜是平滑肌细胞,它们高表达 α-SMA。活化的肌成纤维细胞也高表达 α-SMA。两者在切片上都呈棕褐色胞浆着色,形态上又常常挨着。
不做区分,统计出来的纤维化面积里会混进大量血管。
怎么分开
第一,看形态。血管平滑肌围着管腔排成环状或者纵行,肌成纤维细胞是散在的梭形,走向跟胶原纤维一致。
第二,看位置。离血管壁超过一定距离的区域再统计。设定一个固定距离,写进方法,比如三个血管直径之外。
第三,加标记。CD31 标内皮,desmin 标平滑肌,双标之后再看 α-SMA 的分布,归属会清楚很多。
这支的参数
Ab5694 是兔多克隆,靶点 ACTA2,识别人和小鼠。
应用是 WB 和 IHC,厂家说明里写到 IHC-P 有验证数据。
做纤维化课题,α-SMA 的阳性细胞归属比阳性强度更重要。血管壁的平滑肌细胞本来就高表达,不加其他标记,很容易把它算进肌成纤维细胞里。
多抗识别多个表位,对不同固定方式和修复条件的兼容性通常比单抗宽。做石蜡切片,这是优点。
定量的坑
视野挑在血管密集区,阳性面积会虚高。
随机取样,避开大血管,或者把血管区和间质区分开统计,两组数据分别报。
阳性面积的阈值也要固定。同一个实验室不同人调阈值,结果能差出一倍。
胶原和 α-SMA 一起看,比只看 α-SMA 更接近纤维化的真实情况。
关键参数
| 反应种属 | Human, Mouse |
| 抗原名称 | ACTA2 |
| 验证应用 | WB, IHC |
| 宿主/亚型 | Rabbit / IgG |
| 抗体类型 | Polyclonal |
| 纯化方式 | Affinity purification Immunogen |
| 储存条件 | 短期 +4°C;长期 -20°C |
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参数与产品价格以生知库产品页实时信息为准。文中实验图片取自厂家官网产品页,仅用于说明该抗体的验证情况。