多一条低带，先查降解
N-cadherin 兔单抗，WB 1/5000 到 1/20000
神经组织跑 N-cadherin，目的带在，旁边多了一条明显更低的强带。学生问是不是抗体不纯。
N-cadherin 的胞外域会被金属蛋白酶切下来，释放一段可溶性片段到细胞外。那条低带很可能就是它。
另一种可能是翻译后修饰不同的形式，或者样本降解。三种情况要分开。
两条带的来源
全长蛋白在膜上。胞外域被切之后，剩下的片段留在膜上，切下来的那段跑到胞外。
如果用 C 端表位的抗体，切下来的片段检测不到，膜上的片段分子量小一截。
神经组织里这个过程活跃，突触重塑的时候尤其。
分不清的时候，取培养上清跑一管。上清里有那条低带，说明是被切下来释放出去的片段；没有，说明是胞内的降解产物。
这支的事实
克隆号 EPR1791-4，兔单抗，IgG。反应种属人、小鼠、大鼠。
应用只有两项，WB 和 IHC。WB 的稀释是 1/5000 到 1/20000。
IHC 没有给稀释比。做组织染色要自己摸。
只有两个应用这件事
产品页面上没有 IF/ICC，也没有 IP。做免疫荧光要另找货号，或者自己验证。
没有列不等于不能用，但没有验证过，条件要自己摸。荧光和显色的抗体浓度逻辑不一样。
IP 同理。有 IP 验证的抗体，说明书会给推荐比例，没有的只能试。
选品的时候先把应用对上。做免疫荧光的人拿到这支，等于多花一轮摸索的时间，不如一开始就找标注了 IF/ICC 的货号。
建议
WB 用梯度胶。两条带的差距不大，普通胶分不开。
样本处理快一点。神经组织的蛋白酶活性高，取脑后立刻冻，裂解液里加抑制剂。
IHC 从 1/200 起试。没有推荐值的时候，先跑三个浓度，选信噪比最好的那个。
判读组织时看细胞间的接触面。N-cadherin 在突触和黏着连接处富集，胞质里弥散的信号要谨慎。
N-cadherin 在间叶和神经组织里表达高，做上皮样本时阴性是正常的。WB 的裂解液里加蛋白酶抑制剂，磷酸酶抑制剂对这条通路没必要。做 IHC 时把孵育温度降下来，四度过夜比室温两小时干净。神经组织的切片厚度定在四十微米，太薄容易在取材时把突触那一层撕掉。
上样量按目的蛋白的丰度定。神经组织里这条蛋白不算少，二十微克就够，再多只会让那条低带盖过主带，定量反而没法做。
下次看到多出来的带，先用不同表位的抗体交叉验证。两个都出同一条低带，说明是真实片段。
关键参数
| 反应种属 | Human, Mouse, Rat |
| 抗原名称 | CDH2 |
| 验证应用 | WB, IHC |
| 宿主/亚型 | Rabbit / IgG |
| 抗体类型 | Monoclonal |
| 纯化方式 | Affinity purification Protein A |
| 推荐稀释 | WB 1/5000 - 1/20000 |
| 储存条件 | 短期 +4°C；长期 -20°C |
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