这支 VEGFA 只保 WB

VEGFA 兔多抗，新批次不再保 IHC

订这支之前，同事发来一张别人的 IHC 图，想照着做血管密度。翻产品页到最上面，第一段就是提醒。

新批次的抗体不再保证 ICC/IF、IHC-P、IHC-Fr，理由是这几项没过内部的批检标准。同一段里还建议需要做 ICC/IF 和 IHC-P 的换另一个货号。

这种情况不多见。厂家自己把边界划出来，写清楚哪几项能用，比含糊地列一长串应用要实在。

图 1　Western blot 验证结果（图源：Abcam 官网产品页）

说明书自己划了线

多抗靠动物免疫制备，每一批的滴度和特异性都会漂。漂到某个程度，某些应用就做不稳了。

厂家选择把限制写明白，而不是继续把 IHC 挂在应用列表里。对使用者来说，买之前要先看这一段，而不是只看应用图标。

如果你的实验里 VEGFA 只做 WB 或者 ELISA，这支完全够用。要做切片染色，得另找货号，或者先自己拿阳性对照验一批再决定。

这支的事实

兔多抗，IgG，不带标记。反应种属写了人、小鼠两个。

应用只列了两项，WB 和 ELISA。这个组合在细胞因子检测里很常见，一个看蛋白大小，一个定量。

VEGFA 是分泌蛋白，做 WB 时样本选择跟细胞内蛋白不一样。细胞裂解液里量少，条件培养基里多，这个差别跑一次就能看见。

分泌蛋白的定量还有个老问题。不同批次的血清会影响细胞分泌量，做组间比较多留一管培养基冻起来，回头能补。

条带不止一条

VEGFA 有多个剪接体，翻译出来长度不同。同一份样本跑出来两三条带是正常的，不要急着判成降解。

它还有糖基化和二聚化。还原和非还原条件下跑，位置会不一样。做定量的时候统一条件，否则两批数据没法比。

分泌到培养基里的 VEGFA 会结合肝素和胞外基质。收上清前不要洗太狠，也别用肝素处理过的管子，容易把目标蛋白吸附掉。

抗体的稀释也没给固定值。WB 从 1/1000 起，上清浓缩之后还能更省。

三条操作建议

下单前把产品页那段批检说明截个图存档。同一个货号换了批，限制可能变化。

做 WB 时上清先浓缩。不浓缩直接上样，条带弱到看不出差异，容易误判成处理无效。

做 ELISA 用它做检测抗体时，先跑一条标准曲线看线性范围。多抗做检测端的线性范围通常比单抗窄。

如果一定要做切片，先在自家阳性组织上验一批，出信号再用，别直接铺开做整批。

下次设计实验，把「这个货号不能做什么」写在方案第一行，比写在备注里管用。

关键参数

图 2　Western blot 验证结果（图源：Abcam 官网产品页）

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参数与产品价格以生知库产品页实时信息为准。文中实验图片取自厂家官网产品页，仅用于说明该抗体的验证情况。