内皮染成一片，先看浓度单位
MEC 13.3 克隆，浓缩液 15.625 µg/mL
小鼠脑片的血管染完，低倍下看着挺漂亮。切到二十倍，管壁内外都是棕色，分不清哪一层是内皮。学生说抗体的量加了两倍。翻记录，写的是「加两滴」。
第二个坑在后面。这支是浓缩液，浓度 15.625 µg/mL，不是常见的 1 mg/mL 原液。按滴加，一滴和该取的微升数差着好几倍。
膜蛋白的染色，边界就是结论
CD31 也叫 PECAM-1，130 kDa 的跨膜蛋白，属于免疫球蛋白超家族，管的是细胞与细胞的黏附。
它站在内皮细胞表面，管腔面、细胞间连接处都有。染出来该是一条连续的细线，勾着管腔的轮廓。
边界糊的时候有两种情况。一种是抗体过量，膜外那圈背景把线糊掉了。一种是切片太厚，同一个管腔在两三个焦平面上都有一层信号，叠起来就是一片。
先看厚度。脑和肺的血管壁薄，切片 4 µm 比 8 µm 好判。再看抗体量，不是越多越好。
这支的事实
克隆号 MEC 13.3，大鼠宿主，亚型 IgG2a κ，免疫原用的是 129/Sv 小鼠来源的内皮瘤细胞系 tEnd.1。
亲和层析纯化，缓冲液含 BSA、山羊血清和不超过 0.09% 的叠氮钠。储存写的是 4°C，原液不稀释直接放，不要冻。
反应种属只写了小鼠。做人的样本、做大鼠的样本，都要自己先跑一遍阳性对照，不能直接套。
浓度 15.625 µg/mL 这个数要记住。很多抗体一支是 100 µL 的 1 mg/mL，这支不是同一个量级。配工作液按体积算，2 mL 孵育液要加多少微升，先算出来再吸。
Blocking 那一栏别跳过
应用列表里有一项 Blocking，容易被当成凑数的。
PECAM-1 参与中性粒细胞的跨内皮迁移，抗体占住这个位点，迁移实验里的黏附步骤就会受影响。做这类功能实验时，这支可以当封闭试剂用。
但封闭和染色的浓度逻辑是反的。染色要够量才出信号，封闭要过量才压得住。同一支抗体换用途，别沿用同一套稀释表。
缓冲液里有叠氮钠。做活细胞或者要回收细胞的功能实验，叠氮钠会干扰呼吸链，上机前该换液就换液。
三条能马上用的建议
取用前不要把整支稀释。要多少取多少，剩下的原液回 4°C。反复稀释再冻，活性掉得比想象中快。
IHC 和流式的用量分开记。组织切片按面积算，流式按细胞数算，两个数不能互相换算，写在两行里。
第一次上机带一张正常组织做阳性，淋巴结或者肺都行，血管密，好判。
明天配液的时候，把 15.625 µg/mL 写在管子标签上，和这一管能染几张并排写。看一眼就知道够不够。
关键参数
| 反应种属 | Mouse |
| 抗原名称 | CD31 |
| 验证应用 | IHC, FCM, IF-FRO, IP, Blocking |
| 偶联标记 | Unconjugated |
| 宿主/亚型 | Rat LEW, also known as Lewis IgG2a, κ |
| 抗体类型 | Monoclonal |
| 纯化方式 | affinity chromatography |
| 储存条件 | Store undiluted at 4°C. |
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