这支不能冻，只能放四度
小鼠单抗，31 kDa，线粒体内参
线粒体蛋白定量做完，分装，顺手丢进负八十。
两周后取出来跑 WB，VDAC1 的位置很淡，换了新的一管还是淡。
产品页的保存条件写的是 4°C，储存信息一栏明确写了 Do Not Freeze。这支冻过就废。
为什么线粒体标记能当内参
VDAC 是线粒体外膜上的通道蛋白，负责代谢物进出，表达量在多数组织里比较稳。
做线粒体功能、凋亡、代谢的实验，用它做上样对照比用胞质蛋白更合适，因为它能反映线粒体组分的富集程度。
线粒体分离不纯时，胞质蛋白会混进来。用 VDAC 的富集倍数反推分离质量，比单看蛋白浓度靠谱。
不同组织线粒体含量差别大，心肌和肝高，脾和胸腺低，跨组织比较要按线粒体蛋白定量。
这支认的是 VDAC1 和 VDAC3 两个亚型。产品页标注的分子量是 31 kDa。
这支的事实
小鼠单抗，克隆号 20B12AF2，IgG2b，无标记。靶点 VDAC1，同时认 VDAC3。
种属写了人、小鼠、大鼠、牛四个。应用列了 WB、FCM、IF/ICC 三项。
稀释比给得明确。WB 1 µg/mL，不是比例是浓度。ICC/IF 1/1000，产品页注明只推荐甲醇固定的样本。流式 1 µg 对 10^6 个细胞。
缓冲液是氯化钠加 HEPES，pH 7.5，含 0.02% 叠氮钠。
流式的 1 µg 是绝对量不是稀释比，细胞数变了用量跟着变。
产品页写明做过敲除验证。宿主是小鼠，二抗要选抗小鼠的。
甲醇固定这一条别忽略
ICC 只推荐甲醇固定。多聚甲醛固定会交联蛋白，VDAC 的表位在膜内，交联后就认不到了。
甲醇固定同时起透化作用，固定完直接加一抗，不需要另做透化。
做 ICC 时细胞铺玻底皿，甲醇固定前用 PBS 洗一遍，残留培养基里的蛋白会一起沉。
做流式检测线粒体量，前处理不要用会溶膜的裂解液，膜一破，VDAC 就跟着丢了。
做流式，1 µg 对 10^6 个细胞，细胞数要数准。计数偏差会让染色强度整体偏移。
三条操作建议
按每次用量分装，反复取用带来的温度波动比保存温度本身更伤抗体。
到货就分装到四度，不要进负八十，标签上写清楚不要冻。
WB 按 1 µg/mL 配，配的时候按体积算，不要按稀释比估。
线粒体组分和全细胞裂解液各跑一孔，两条带的位置和强度对照着看。
下次做线粒体实验，把它和另一个胞质内参一起上，两个对照互相印证。
关键参数
| 反应种属 | Human, Mouse, Rat, Bovine |
| 抗原名称 | VDAC1 |
| 验证应用 | WB, FCM, IF/ICC |
| 宿主/亚型 | Mouse / IgG2b |
| 抗体类型 | Monoclonal |
| 推荐稀释 | WB 1 µg/mL；ICC/IF 1/1000 Recommended for methanol-fixed samples in ICC only.；Flow Cyt 1 µg for 10^6 Cells ab170192 - Mouse monoclonal IgG2b, is suitable for use as an isotype control with this antibody. |
| 储存条件 | 短期 +4°C；长期 +4°C |
相关产品
点击货号或品名可查看生知库产品页的完整参数与报价。
参数与产品价格以生知库产品页实时信息为准。文中实验图片取自厂家官网产品页，仅用于说明该抗体的验证情况。