一支抗体同时认 I 型和 III 型胶原

Anti-Collagen I + Collagen III，兔多抗

纤维化的片子染出来，间质全是棕色。审稿人问，I 型和 III 型的比例是多少。

你翻产品页，发现这支抗体的名字里写着两个加号。

它同时认两种胶原，没法告诉你比例。

厂家为什么会做这样的抗体

I 型和 III 型胶原在组织里经常一起出现，氨基酸序列有相当程度的同源。用混合抗原免疫，得到的多克隆血清能同时识别两者。

对某些实验来说这不是缺点。只想看总胶原沉积的量，或者做组织工程的基质评估，一支抗体就够了。

但课题要区分 I 型和 III 型的转换，比如心肌梗死后从 III 型向 I 型的转变，这支抗体帮不上忙。

审稿人问的往往就是这一类问题。设计实验的时候先想清楚要不要留后手。

买之前先想清楚问题问的是什么。问「沉积了多少」和问「是哪种胶原」，对应的是两类试剂。

抗体的事实

Ab34710 是兔多克隆，靶点标的是 COL1A1，反应种属给人。

名字里带加号，说明它对人的 I 型和 III 型胶原都有反应。

验证应用是 WB、IHC-P 和 ICC/IF。

产品页没有给固定的稀释比。这一点要先接受，做之前得自己摸条件，摸不出稳定结果时不能怪抗体。

没有固定稀释比不代表没法用，只是每换一批样本都要重新定一次滴度。

定好的条件写下来，换人接手时不用从头再摸。

摸条件的顺序

先定抗原修复。胶原是细胞外基质蛋白，交联紧密，柠檬酸 pH 6 和 EDTA pH 9 两种修复都试一遍，看哪种背景更低。

再定浓度。从 1 微克每毫升往下走，两倍梯度，五个点。

封闭用 BSA，比用血清稳。血清里的成分杂，容易加背景。

显色时间控制在五分钟以内。胶原的信号强，时间一长间质会糊成一片，胞核和纤维分不开。

背景压不住的时候先降浓度，不要靠缩短显色硬救。显色一短，弱阳性区域就丢了。

要分型怎么办

另配 I 型或者 III 型的单标抗体，切连续切片，两张片子对照着看。这是最省事的做法，代价是多花一支抗体的钱。

或者做 WB。两种胶原都属于大分子量蛋白，常规浓度的胶跑不开，转膜时间也要延长，湿转过夜更稳。

做 WB 还有一个前提。完整的胶原三螺旋在 SDS 里不容易进胶，样本要先做酶消化。

反应种属这一栏只写了人。做大鼠或者小鼠模型的时候要留意，其他种属不在标注范围内。

下批切片，切两张连续片，一张用这支抗体看总量，一张留给定型用的单标。

关键参数

反应种属	Human
抗原名称	COL1A1
验证应用	WB, IHC, IF/ICC
宿主/亚型	Rabbit / IgG
抗体类型	Polyclonal
纯化方式	Affinity purification Immunogen
储存条件	短期 +4°C；长期 -20°C

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品牌	货号	品名
Abcam	Ab34710	Anti-Collagen I + Collagen III antibody 本文产品
abclonal	A1352	Collagen I/COL1A1 Rabbit pAb
Abcam	Ab7778	Anti-Collagen III antibody
Abcam	Ab184993	Anti-Collagen III antibody [EPR17673]

参数与产品价格以生知库产品页实时信息为准。文中实验图片取自厂家官网产品页，仅用于说明该抗体的验证情况。