0.034 微克每毫升，浓度低得反常
Anti-alpha SMA [1A4]，小鼠单抗，WB 1 µg/mL
配一抗的时候，产品页写的是 0.034 微克每毫升。你手上是一支 0.2 毫克每毫升的原液。
算了两遍还是不敢信。这个浓度放在 1 毫升稀释液里，加的抗体不到 0.2 微升。
为什么浓度会这么低
1A4 这株克隆用了很多年，效价高是它出名的原因。
α-SMA 在肌成纤维细胞和血管平滑肌里含量高，抗原密度大，抗体不需要浓。
浓度低还有一个好处，背景干净。α-SMA 的染色最怕间质弥散，浓度一高，胶原纤维上也会挂上颜色。
反过来算，如果按常规的 1/100 配，间质会变成一片深棕，细胞形态全看不出来。
做小鼠组织时这一点更明显，背景一起，阳性区域的边界就没了。
参数和换算
Ab7817 是 1A4 克隆，小鼠单克隆，IgG2a 亚型，识别人、小鼠、大鼠的 α-SMA。
验证应用是 WB、IHC-P、流式胞内和 ICC/IF。
厂家给的是浓度，不是稀释比。IHC-P 0.034 微克每毫升，WB 1 微克每毫升，ICC/IF 1 微克每毫升，流式胞内 5 微克每毫升。
四个系统里 IHC 的用量最低，和流式差了近一百五十倍。按浓度算，别按比例算。
同一支抗体在不同系统里的差别，比不同批次之间的差别大得多。
换算容易出错的地方
原液的浓度标签写在管子上，单位是 mg/mL 还是 µg/mL，先看清。
0.2 mg/mL 就是 200 µg/mL。配 0.034 µg/mL 要稀释五千多倍，这个倍数没法用移液器直接取，中间要做两级稀释。
中间稀释液用含 BSA 的 PBS，不要用水。浓度低到这个程度，抗体容易贴在管壁上，加蛋白能减少损失。
两级稀释的中间液浓度记下来，下一次照着配，不用重新算一遍。
移液器吸 0.2 微升不准，中间稀释就是为了绕开这个误差。配完在管盖上记一笔实际浓度，下一个人拿起来就能用。
配好的工作液当天用完，放四度过夜再染，信号会掉。
判读上的事
α-SMA 阳性是胞浆染色。肌成纤维细胞呈梭形，血管壁的平滑肌层也强阳性。
正常组织里的血管本来就阳性。做肿瘤间质评估时，血管要排除在计数之外。
治疗组间质 α-SMA 下降，先确认切片里血管的数量没有变，否则看到的可能是取材差异。
计数用软件划阈值，人工读片的主观性太大，两个人之间的差异能到两成。
明天配液前，先在管子上贴一张换算表，把 µg/mL 和稀释倍数写在一起。
关键参数
| 反应种属 | Human, Mouse, Rat |
| 抗原名称 | ACTA2 |
| 验证应用 | WB, IHC, FCM, IF/ICC |
| 宿主/亚型 | Mouse / IgG2a |
| 抗体类型 | Monoclonal |
| 纯化方式 | Affinity purification |
| 推荐稀释 | IHC-P 0.034 µg/mL Perform heat-mediated antigen retrieval before commencing with IHC staining protocol.；WB 1 µg/mL；ICC/IF 1 µg/mL；Flow Cyt (Intra) 5 µg/mL |
| 储存条件 | 短期 +4°C；长期 -20°C |
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参数与产品价格以生知库产品页实时信息为准。文中实验图片取自厂家官网产品页，仅用于说明该抗体的验证情况。