GFAP 只认两个种属，用之前先确认
Anti-GFAP，兔多抗，小鼠和大鼠
人脑类器官的片子染 GFAP，一抗四度过夜，二抗孵育一小时，DAB 显色。
片子上什么都没有。
你回头看产品页，反应种属那一栏写的是小鼠、大鼠。
种属不对最容易被忽略
说明书上，反应种属和验证应用一样重要。
一支抗体在大小鼠里染得漂亮，不代表它认人的 GFAP。物种间的序列差异可能正好落在表位上。
Ab7260 标的是小鼠和大鼠，人样本不在范围内。用人源样本做，结果不可预期，做不出来也说明不了抗体好坏。
买之前先看这一栏，比看验证应用更快筛掉不合适的。
种属清单短的产品，多半只在一个物种里做过充分验证。
这支抗体的定位
Ab7260 是兔多克隆，靶点 GFAP，反应种属小鼠、大鼠。
验证应用给得比较全，WB、IHC-P、PFA 固定的 IHC、ICC/IF 和 IP。
产品页没有给固定的稀释比，各个系统要自己摸。
多克隆的批间差异需要留意。同一批动物实验尽量用同一批号，中途换批，组间的染色深浅会跟着变。
预实验做一次梯度，把阳性最强的稀释度记下来，正式实验直接用。
梯度四个点就够，1/100、1/200、1/400、1/800。
GFAP 染色的判读
星形胶质细胞的形态是判读重点。静息态胞体小，突起细长。反应性增生时胞体变大，突起变粗，中间丝明显增多。
损伤模型里 GFAP 上调是必然的。处理组和对照组的差异，很多时候反映的是损伤程度不同，不是干预效果。
看片子的时候先确认损伤范围一致，再比较染色强度。
定量的时候选同一个解剖位置，皮层和海马的基础水平差得远。
同一个脑，海马 CA1 和齿状回的强度也不一样，别混着数。
摸条件的顺序
WB 从 1/1000 起，IHC 从 1/200 起。两个系统的起点不要混。
IHC 的抗原修复走柠檬酸 pH 6。GFAP 在甲醛固定之后要加热才能把表位露出来，修复不到位，阳性细胞只剩零星几个。
修复不到位的片子有个特点，阳性细胞只在切片边缘出现，中间是空的，这个现象很好认。
出现了就重做修复，别在显色上找补。
做 ICC/IF，细胞用多聚甲醛固定，破膜用 Triton X-100，时间别超过十分钟，星形胶质细胞的突起很脆。
固定时间也要控制。超过二十分钟，GFAP 的染色会变粗，突起分不开，计数就没法做。
下单之前先翻到反应种属那一栏，看人有没有在里面。
关键参数
| 反应种属 | Mouse, Rat |
| 抗原名称 | GFAP |
| 验证应用 | WB, IHC, IF/ICC, IP |
| 宿主/亚型 | Rabbit / IgG |
| 抗体类型 | Polyclonal |
| 储存条件 | 短期 +4°C；长期 -20°C |
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参数与产品价格以生知库产品页实时信息为准。文中实验图片取自厂家官网产品页，仅用于说明该抗体的验证情况。