一支 β-actin，能管五个种属
Beta Actin 多抗，WB/IHC/ELISA/IF 四用
课题换到犬源细胞系，原来的内参抗体不认了，条带一片空白。
翻产品页找替代，看到这支标了五个种属，人和猴都在里面，先订一支试。
跑完胶，位置对，强度也正常。
actin 家族不止一个 β
肌动蛋白在真核细胞里至少有六种异构体，β 和 γ 是细胞质里的主要两种，序列相似度很高。
相似度高带来一个实际问题：抗体很难只认 β 不认 γ。多数标为 β-actin 的抗体，实际识别的是 β 和 γ 的共同表位。
做常规内参这不影响结论，因为两者加起来的总量稳定。但如果课题本身在研究某一个异构体的表达变化，就要换异构体特异的抗体。
另一个容易忽略的点是定位。β-actin 参与细胞骨架和细胞质的可溶部分，裂解条件不同，上清里的量会差。
产品页写的纯化方式是抗原亲和纯化，液体剂型。这类纯化对抗体的特异性有帮助，代价是产量低，价格通常比蛋白 A 纯化的高一档。
这支抗体的数据
20536-1-AP 是兔多克隆，IgG 亚型，抗原是 Beta Actin。
种属写了五个：人、小鼠、大鼠、犬、猴。跨物种范围在同价位的内参抗体里算宽的。
验证过的应用四个：WB、IHC、ELISA 和 IF/ICC。组化上 actin 染的是胞质，可以作为组织切片的通用参照。
产品页没有给固定的稀释比。这类多抗的批间差异需要用每批的实测来定，第一次用建议先做一个梯度。
跨物种范围宽的另一面是，同一支抗体在不同种属上的最佳浓度可能不一样。人和犬的样本混跑，两边都出现背景时，先分别调。
什么样本要特别注意
肌肉组织的样本要慎用。骨骼肌和心肌里的 actin 以 α 型为主，β 的比例和培养细胞不一样，用它当内参容易把上样量的差异带进结论。
血清饥饿或者细胞骨架药物处理之后，可溶态和聚合态的分配会变，同一份裂解液重复测可能不一致。
做组织 IHC 时，actin 的阳性很强，容易压过同片上的弱信号。多标实验把它放到末轮。
三条操作建议
第一次用先做 1/500、1/1000、1/2000 三个梯度，挑背景最干净的一档，记进实验室的抗体本。
裂解液里加去垢剂之后超声几秒，保证骨架部分也进上清。上样之前煮沸五分钟，多抗在变性条件下识别更稳定，别用非还原的上样缓冲液。
不同种属的细胞混在一张胶上时，先各跑一孔确认条带位置一致，再合并统计。
下一批样品，五个种属各留一孔做阳性对照，跑完再定量。
关键参数
| 反应种属 | Human, Mouse, Rat, Dog, Monkey |
| 抗原名称 | Beta Actin |
| 验证应用 | WB, IHC, ELISA, IF/ICC |
| 偶联标记 | Unconjugated |
| 宿主/亚型 | Rabbit / IgG |
| 抗体类型 | Polyclonal |
| 纯化方式 | Antigen affinity purification |
| 储存条件 | Store at -20°C. Stable for one year after shipment. Aliquoti |
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| 品牌 | 货号 | 品名 |
|---|---|---|
| proteintech | 20536-1-AP | Beta Actin Polyclonal antibody 本文产品 |
| proteintech | 66009-1-Ig | Beta Actin Monoclonal antibody |
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