III 型胶原的种属，说明里对不上

III 型胶原兔多抗，人、大鼠、牛

心肌纤维化模型，III 型胶原该在间质里织成网。染出来只有血管外膜一圈，间质是空的。

学生翻产品页，种属那栏写着人、大鼠、牛。他做的是小鼠。

种属那处对不上

产品页的种属列表和说明摘录不一致。列表写的是人、大鼠、牛，摘录里提到做过小鼠样本的验证。

这种矛盾在整理数据时常见。以列表为准更安全，摘录可能是模板拼接的。

做小鼠样本，先跑一管阳性对照。心肌、皮肤、血管都行，正常组织里 III 型胶原的丰度不低。

阳性对照出不来，就别在模型片上耗时间。换货号比调条件快。

回过头看这个靶点。它是纤维状胶原，和 I 型一起组装成异型纤维。血管外膜、间质、基底膜下方都有。

丰度比 I 型低。做双标时 I 型的信号会压过 III 型，通道要平衡。

纤维化早期 III 型先升，后期 I 型占主导。取样时间点不同，看到的比例不一样。

这支的事实

兔多克隆，IgG，未标记。反应种属人、大鼠、牛。

应用五项，WB、IHC、ELISA、IF/ICC、IP。产品页没有给固定稀释比。

多抗识别多个表位，对交联的耐受性好一些，适合做甲醛固定的石蜡切片。

修复对胶原很关键

胶原交联密，甲醛固定后抗原决定簇被埋得深。常规的热修复时间往往不够。

Tris/EDTA pH 9.0，微波加热，累计二十到三十分钟。或者用胃蛋白酶做酶消化，三十七度十分钟。

两种方法可以叠起来试一次。修复不足的表现是间质一片淡，血管外膜勉强能看。

修复过头也有迹象。间质整体泛黄，细胞核也开始着色，这时候要缩短时间而不是加浓度。

建议

做小鼠样本，先用正常小鼠心肌做阳性对照，出信号再上模型片。

双标时把 III 型放在前面孵育，或者用酪胺信号放大。丰度低的靶点先染。

WB 上胶原的带位置偏高，样本要先做胃蛋白酶消化再上样，否则大分子进不了胶。

定量分析选间质区域，把血管外膜排除。两个区域的胶原密度差得多，混在一起算，组间差异会被稀释掉。

做 WB 时，还原胶上常看到多条带，前体和成熟形式都在，定量选最上面那条。双标时 I 型和 III 型用不同种属的抗体，二抗才分得开。整体定量建议做全片扫描，视野挑选带来的偏差比分光度的误差大得多。

酶消化和热修复别同时做。胃蛋白酶处理过的片子，热修复会把组织泡烂，边缘卷起来，那一片的定量就废了。

下次看到间质空的片子，先查种属，再查修复时间，两处都不对的时候别急着换抗体。

关键参数

反应种属	Human, Rat, Bovine
抗原名称	COL3A1
验证应用	WB, IHC, ELISA, IF/ICC, IP
宿主/亚型	Rabbit / IgG
抗体类型	Polyclonal
纯化方式	Affinity purification Immunogen
储存条件	短期 +4°C；长期 -20°C

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品牌	货号	品名
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