p62 升高，可能是堵了

p62 兔多抗，七类应用，只写人

加雷帕霉素处理六小时，收蛋白跑 p62。条带比对照高了一截，组会上被问是不是自噬被抑制了。

按常规理解，自噬增强时 p62 应该降。这次涨了，说明自噬流可能被堵在降解那一步。

只测一个时间点、一个自噬标记，得不出结论。这是自噬实验最常见的坑。

图 1　Western blot 验证结果（图源：proteintech 官网产品页）

它是货物受体，也是底物

p62 又叫 SQSTM1，是一个多功能的接头蛋白。它一头结合泛素化的货物，一头结合 LC3，把货物送进自噬体。

自噬体形成、跟溶酶体融合、内容物降解，这条链走通，p62 自己也被降解掉。

所以 p62 的量取决于合成和降解两头。合成增加、降解受阻、或者流被堵住，都可能让它在 WB 上升高。

单看 p62 升高，分不清是哪一种。要加 LC3-II 和自噬流阻断剂一起看。

它还有聚合的倾向。p62 积累到一定程度会自己聚成颗粒，WB 上可能出现卡在加样孔里跑不进胶的东西。

这支的事实

Proteintech 的兔多抗，IgG，不带标记。反应种属只写了人一个。

应用列了七项，WB、IHC、ELISA、FCM、IF/ICC、IP。做定位、做拉蛋白、做定量都有覆盖。

只写人的限制要记住。做小鼠模型时别默认能用，除非自己拿阳性组织验过。

多抗识别多个结构域，p62 被 caspase 切开后的片段也可能被识别，WB 上出现小分子量条带属于常见现象。

做 IF 时 p62 的斑点大小跟自噬体数量有关，别只数点数，也看大小。

判断自噬流要看三个点

第一，LC3-I 到 LC3-II 的转换比例。第二，p62 的量。第三，加不加溶酶体抑制剂，比如氯喹。

加了氯喹，p62 和 LC3-II 都涨，说明流是通的，只是被堵住，这是阳性对照该有的样子。

加了氯喹，p62 不涨，反而说明上游有问题，自噬体根本没形成。

三个点一起看，才能说「自噬增强」还是「自噬受阻」。只报 p62 一个数，方向可能正好反了。

三条操作建议

WB 从 1/1000 起试，产品页没给固定稀释。p62 在多数细胞里表达不低，浓度高了背景杂。

做 IF 看 p62 斑点，固定后通透要够。p62 聚在自噬体里，通透不足看不到点状结构。

IHC 判读看胞质。p62 在肿瘤细胞里常呈弥漫胞质染色，跟核染区分开。

报告里把三个指标一起写。只写 p62 那一句结论，审稿人一眼能看出缺了阻断对照。

下次做自噬实验，把氯喹组和雷帕霉素组一起排进方案，p62 的单点数据才有解释力。

关键参数

图 2　Western blot 验证结果（图源：proteintech 官网产品页）

相关产品

点击货号或品名可查看生知库产品页的完整参数与报价。

参数与产品价格以生知库产品页实时信息为准。文中实验图片取自厂家官网产品页，仅用于说明该抗体的验证情况。