Ki-67 的阳性率怎么数
Ki-67 兔多抗，五类应用，只写人
肿瘤组织芯片染色，病理科要一个 Ki-67 指数。两个人数同一张片子，一个报 40%，一个报 25%。
两个人都没数错，只是选了不同的视野。一个在 hotspot 区，一个在肿瘤边缘。
这类差异在增殖标记上特别常见，跟抗体关系不大，跟怎么数关系很大。
它在周期的哪儿
Ki-67 是增殖标记。G1、S、G2 和 M 期都在，G0 期不在。
细胞周期往前走，它的含量跟着涨，到 M 期最高。所以染色强度本身也带信息，不只是有和没有。
这也解释了为什么判读要看整片。只盯着最深的几个核，指数会偏高；只看随机视野，散在的阳性细胞容易被漏。
固定时间也会影响深浅。存放多年的老片子染得浅，不代表增殖低，跨批次比较时要先看同批的对照片。
这支的事实
Proteintech 的兔多抗，IgG，不带标记。反应种属只写了人一个。
应用列了五项，IHC、ELISA、FCM、IF/ICC、IF-P。石蜡切片和冰冻切片都能做，原位和悬液也都能用。
只写人这一点要留意。做小鼠移植瘤、大鼠模型的，别默认它通用。跨种属用之前自己拿阳性组织验一张，省得整批切片返工。
多抗的优势在石蜡样本里更明显。甲醛固定时间长，抗原决定簇被遮蔽，多抗识别多个位点，总有能结合上的。
数法比染色更影响结果
标准做法是先低倍扫全片，找阳性最密集的区域，再在高倍下数。这个区域叫热点区，每张片子选三到五个。
计数的时候按网格走，数够五百个肿瘤细胞，算出百分比。间质细胞和淋巴细胞不算进去，它们也表达 Ki-67。
两个人数同一批片子之前，先坐下来对十张，把「什么算阳性」定死。核染成什么颜色算，弱染算不算，说清楚了再分开数。
不同肿瘤类型的界值不一样。乳腺、淋巴瘤、神经内分泌各有各的分界，报告里写清用的是哪一套标准，比只给一个数字有用。
三条操作建议
产品页没给固定稀释比。石蜡切片从 1/200 起试，梯度上 1/100、1/400 各一张，挑核信号清楚、背景干净的那档。
抗原修复用柠檬酸还是 EDTA，取决于固定时间。固定过夜的老片子，EDTA pH 9.0 的修复往往更彻底。
复染苏木素不要过深，否则弱阳性的核会被盖住，指数偏低。
计数的原始图要留档。有争议的时候回看原图，比重新染色快得多。
下次读片，报告里把视野选择方式和计数细胞数写上，两个数才有可比性。
关键参数
| 反应种属 | Human |
| 抗原名称 | KI67 |
| 验证应用 | IHC, ELISA, FCM, IF/ICC, IF-P |
| 偶联标记 | Unconjugated |
| 宿主/亚型 | Rabbit / IgG |
| 抗体类型 | Polyclonal |
| 纯化方式 | Antigen affinity purification |
| 储存条件 | Store at -20°C. Stable for one year after shipment. Aliquoti |
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| 品牌 | 货号 | 品名 |
|---|---|---|
| proteintech | 27309-1-AP | Ki-67 Polyclonal antibody 本文产品 |
| Abcam | Ab15580 | Anti-Ki67 antibody |
| Abcam | Ab16667 | Anti-Ki67 antibody [SP6] |
| Abcam | Ab92742 | Anti-Ki67 antibody [EPR3610] |
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