八种应用，一支 α-SMA
兔多抗，全长免疫原，覆盖八类实验
血管环铺在胶原凝胶上，收缩实验做完，把凝胶连血管一起固定，做 α-SMA 免疫荧光。
同一支抗体，换到另一批只做了 WB 的裂解液上，条带位置对得上，但多出一条更靠上的弱带。
查了产品页才知道，免疫原是带 GST 标签的重组全长蛋白。样本里如果自己带 GST，这条弱带就有了解释。
全长免疫原带来的宽识别
这支的免疫原是重组人 ACTA2，大肠杆菌表达，GST 标签，覆盖 1 到 377 位，基本是全序列。
全长免疫原的好处是表位多，变性、固定、切片这几种处理之后，还剩得下能认的位点。八种应用列在一起，靠的就是这一点。
代价是它不只看一个位点。产品页写明可能与其他肌动蛋白亚型交叉。做心肌、骨骼肌样本时，α-SMA 和别的亚型同时存在，条带不会自己分开。
八种应用里，IF-P 和 IF-FRO 分别对应石蜡切片和厚片透明化，对表位暴露的要求高，第一次做先拿阳性组织试修复条件。
这支的事实
兔多抗，IgG，未偶联，抗原亲和纯化。缓冲液是 PBS，含 0.02% 叠氮钠和 50% 甘油，pH 7.3。
种属写了人、小鼠、大鼠。应用列了 WB、IHC、ELISA、FCM、IF/ICC、IF-P、IF-FRO、IP 共八项。
产品页给了 RRID，写方法时可以直接填这个编号。
-20°C 保存，到货后一年内稳定。产品页注明这个温度下不必分装，这一点和很多同类产品不同。
交叉反应怎么处理
做血管、气道、肠壁这类平滑肌丰富的组织，α-SMA 信号强，交叉反应不明显。
做心肌或者骨骼肌，要在同一张膜上并排跑一个已知不含 α-SMA 的样本做参照。
做 IF 双标时，另一通道不要选泛肌动蛋白抗体，两个通道会互相印证同一个东西。
做血管形态学定量，数血管条数比测灰度稳，灰度受曝光和切片厚度影响太大。
如果样本是 GST 融合蛋白，WB 上多出来的那条带先排除标签来源，再怀疑降解。
做 WB 时，目标条带和 β-actin 内参位置靠得近，胶浓度调高一点，两条带分得开，判读不容易串。
三条操作建议
IHC 用柠檬酸 pH 6.0 修复，二十分钟，平滑肌纤维在片子上边界清楚。
流式做胞内染色，固定后破膜时间不要超过十分钟，肌动蛋白纤维容易被过度消化。
IP 用低盐缓冲液，150 mM 氯化钠起，盐再高拉下来的非特异会多。
下次做双标，先单染两个通道各看一遍，再合并。
关键参数
| 反应种属 | Human, Mouse, Rat |
| 抗原名称 | Alpha smooth muscle actin |
| 验证应用 | WB, IHC, ELISA, FCM, IF/ICC, IF-P, IF-FRO, IP |
| 偶联标记 | Unconjugated |
| 宿主/亚型 | Rabbit / IgG |
| 抗体类型 | Polyclonal |
| 纯化方式 | Antigen affinity purification |
| 储存条件 | Store at -20°C. Stable for one year after shipment. Aliquoti |
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